| 对虾Taura综合症病毒Taqman实时定量RT-PCR检测方法的建立与应用 |
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| 引用本文： | 岳志芹,刘荭,梁成珠,高宏伟,雷质文,徐彪,朱来华,江育林.对虾Taura综合症病毒Taqman实时定量RT-PCR检测方法的建立与应用[J].中国预防兽医学报,2008,30(2):141-144. |
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| 作者姓名： | 岳志芹 刘荭 梁成珠 高宏伟 雷质文 徐彪 朱来华 江育林 |
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| 作者单位： | 1. 山东出入境检验检疫局,检验检疫技术中心,山东,青岛,266002
2. 深圳出入境检验检疫局,水生动物疫病国家重点实验室,广东,深圳,518010 |
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| 基金项目： | 国家质量检度检验检疫总局资助项目 |
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| 摘 要： | 建立了Taqman实时定量RT-PCR方法检测对虾的Taura综合症病毒(Taura syndrome virus,TSV).选取TSV基因组的保守序列,利用Primer Express 2.0软件设计引物和探针,扩增产物长度为73 bp.以含有TSV目的扩增片段的质粒为标准品,进行实时定量RT-PCR反应,结果表明质粒DNA在6～6×106个拷贝,共7个数量级的范围内有"S"型扩增曲线.根据病毒拷贝数与Ct值制备了标准曲线,可以用于病毒的定量分析.该方法的检测灵敏度为6个病毒粒子.该方法的重现性好,组内的实验变异系数为0.04%～2.70%,组间实验变异系数为0.92%～4.67%.引物和探针对于对虾基因组RNA、黄头病毒RNA都没有扩增反应,表现出良好的特异性.实时定量RT-PCR检测TSV方法的建立,对于虾病的临床诊断及流行病学研究具有重要意义.
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| 关 键 词： | TSV 实时定量RT-PCR Taqman探针 综合症 病毒 Taqman 实时定量 检测方法 建立与应用 virus syndrome detection assay quantitative application 意义 研究 流行病学 临床诊断 虾病 表现 扩增反应 变异系数 |
| 文章编号： | 1008-0589（2008）02-0141-04 |
| 收稿时间： | 2007-08-16 |
| 修稿时间： | 2007年8月16日 |
Development and application of Taqman real-time quantitative RT-PCR assay for detection of taura syndrome virus in shrimps |
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| YUE Zhi-qin,LIU Hong,LIANG Cheng-zhu,GAO Hong-wei,LEI Zhi-wen,XU Biao,ZHU Lai-hua,JIANG Yu-lin.Development and application of Taqman real-time quantitative RT-PCR assay for detection of taura syndrome virus in shrimps[J].Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine,2008,30(2):141-144. |
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| Authors: | YUE Zhi-qin LIU Hong LIANG Cheng-zhu GAO Hong-wei LEI Zhi-wen XU Biao ZHU Lai-hua JIANG Yu-lin |
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