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NEFA对体外培养奶牛肝细胞氧化还原状态的影响
引用本文:董记红,吴金节,林根祥,等. NEFA对体外培养奶牛肝细胞氧化还原状态的影响[J]. 西北农林科技大学学报(自然科学版), 2017, 45(6): 37-43
作者姓名:董记红  吴金节  林根祥  
作者单位:安徽农业大学 动物科技学院,安徽农业大学 动物科技学院,安徽农业大学 动物科技学院
基金项目:国家自然科学基金项目(31502136);安徽省自然科学基金项目(1608085QC56);安徽农业大学青年科学基金重点项目(2014zr008);安徽农业大学稳定和引进人才科研项目(yj2015-14);安徽省现代农业产业技术体系项目(2016-2020)
摘    要:【目的】研究高非酯化脂肪酸(NEFA)对体外培养奶牛肝细胞的氧化应激状态、氧化抗氧化酶活性及mRNA表达的影响。【方法】分离奶牛肝细胞,培养72h后,添加不同浓度(0.0,0.3,0.6,1.2和2.4mmol/L)的NEFA继续培养12,24和36h,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法,检测过氧化氢(H2O2)、丙二醛(MDA)含量及总抗氧化能力(TAC)、羟自由基抑制能力和超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、过氧化氢酶(CAT)的活性,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测GSH-Px、SOD、CAT基因mRNA的相对表达量。【结果】随着NEFA浓度的增加,添加NEFA 12,24和36h时,各处理组肝细胞中H2O2和MDA含量增加,TAC含量、SOD、GSH-Px、CAT的活性以及羟自由基抑制能力降低。与对照组相比,添加NEFA 12和36h时,SOD mRNA相对表达量均随NEFA浓度的增加呈剂量依赖性降低;添加NEFA 24h时,0.6,1.2和2.4mmol/L NEFA处理组的SOD mRNA相对表达量均极显著降低(P0.01)。添加NEFA 12h时,各浓度NEFA处理组GSH-Px mRNA相对表达量均极显著降低(P0.01);添加NEFA 24h时,1.2和2.4mmol/L NEFA处理组的GSH-Px mRNA相对表达量均极显著降低(P0.01),0.6mmol/L NEFA处理组的GSH-Px mRNA相对表达量显著降低(P0.05);添加NEFA 36h时,GSH-Px mRNA相对表达量随NEFA浓度的增加呈剂量依赖性降低。添加NEFA 12h时,0.6和2.4mmol/L NEFA处理组的CAT mRNA相对表达量均极显著降低(P0.01);添加NEFA 24和36h时,CAT mRNA相对表达量呈剂量依赖性降低。【结论】NEFA诱导体外培养的奶牛肝细胞发生氧化还原失衡,尤其以高浓度NEFA诱导的氧化应激更为严重。

关 键 词:非酯化脂肪酸;奶牛;肝细胞;氧化应激
收稿时间:2016-04-27

Effect of NEFA on redox state of hepatocytes in vitro from dairy cow
DONG Jihong,WU Jinjie and LIN Genxiang,et al. Effect of NEFA on redox state of hepatocytes in vitro from dairy cow[J]. Journal of Northwest A&F University(Natural Science Edition), 2017, 45(6): 37-43
Authors:DONG Jihong  WU Jinjie  LIN Genxiang  et al
Abstract:
Keywords:non-esterified fatty acids  dairy cow  hepatocytes  oxidative stress
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