| 综合征病毒与中国对虾血细胞膜体外结合实验研究 |
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| 引用本文： | 林颖博,战文斌,邢婧,唐小千,刘宝良. 综合征病毒与中国对虾血细胞膜体外结合实验研究[J]. 水产学报, 2008, 32(5): 788-793 |
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| 作者姓名： | 林颖博 战文斌 邢婧 唐小千 刘宝良 |
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| 作者单位： | 中国海洋大学教育部海水养殖重点实验室,山东青岛,266003 |
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| 基金项目： | 国家高技术研究发展计划(863计划)，国家重点基础研究发展计划(973计划) |
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| 摘 要： | 筛选小分子受体配基或抗受体蛋白的单克隆抗体作为阻断剂,是阻断病毒感染的有效途径.通过差速离心法提取海捕中国对虾血细胞膜,分别利用Dot-Blot和ELISA技术,将血细胞膜包被于硝酸纤维素(NC)膜或酶标板,使地高辛(Digoxigenin,DIG)标记的对虾白斑综合征病毒(WSSV-DIG)与之4℃结合4 h,并以碱性磷酸酶标记抗DIG抗体作为探针检测,实验结果皆为阳性,证明体外环境下WSsV能稳定地与血细胞膜结合.通过血细胞膜免疫Balb/c小鼠生产抗中国对虾血细胞多克隆抗体,以该多抗37℃孵育血细胞膜1 h,然后使WSSV-DIG与血细胞膜结合并检测.在Dor-Blot实验中,阻断组发色明显浅于未阻断组;在ELISA实验中,阻断组OD值比未阻断组降低69%.可以推断,多抗中抗血细胞受体的抗体与血细胞膜上的受体蛋白结合,占据了WSSV黏附蛋白的结合位点,从而显著地抑制了WSSV与血细胞膜的体外结合.实验所建立的WSSV与对虾血细胞膜体外结合技术可以应用于WSSV与血细胞受体蛋白的黏附特性的研究以及WSSV阻断剂的筛选,多抗阻断实验证明了本方法的可行性.
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| 关 键 词： | 白斑综合征病毒 血细胞膜 受体蛋白 阻断剂 |
| 收稿时间： | 2007-08-27 |
| 修稿时间： | 2007-11-04 |
Researches on in vitro combination of WSSV and haemocyte plasma membrane of Chinese shrimp (Fenneropenaeus chinensis) |
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| LIN Yinbo,ZHAN Wenbin,XING Jing,TANG Xiaoqian and LIU Baoliang. Researches on in vitro combination of WSSV and haemocyte plasma membrane of Chinese shrimp (Fenneropenaeus chinensis)[J]. Journal of Fisheries of China, 2008, 32(5): 788-793 |
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| Authors: | LIN Yinbo ZHAN Wenbin XING Jing TANG Xiaoqian LIU Baoliang |
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| Affiliation: | Key Laboratory of Mariculture, Ministry of Education, Ocean University of China,Key Laboratory of Mariculture, Ministry of Education, Ocean University of China,Key Laboratory of Mariculture, Ministry of Education, Ocean University of China,Key Laboratory of Mariculture, Ministry of Education, Ocean University of China and Key Laboratory of Mariculture, Ministry of Education, Ocean University of China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | white spot syndrome virus haemocyte plasma membrane receptor inhibitor |
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