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F17大肠埃希菌黏附湖羊小肠上皮细胞模型的初步建立
引用本文:王悦,顾亦飞,邹双霞,王善禾,孙伟.F17大肠埃希菌黏附湖羊小肠上皮细胞模型的初步建立[J].扬州大学学报(农业与生命科学版),2020,41(4):82-86,95.
作者姓名:王悦  顾亦飞  邹双霞  王善禾  孙伟
作者单位:扬州大学动物科学与技术学院,江苏扬州225009;扬州大学动物科学与技术学院,江苏扬州225009;扬州大学教育部农业与农产品安全国际联合研究实验室,江苏扬州225009
基金项目:江苏高校优势学科建设工程项目;国家自然科学基金;江苏省高等学校自然科学研究重大项目;江苏省农业科技自主创新项目;江苏省"六大人才高峰"高层次人才项目;江苏省重点研发计划现代农业项目;江苏省农业重大新品种创制项目
摘    要:为探究F17大肠埃希菌对湖羊小肠上皮细胞的黏附机制,以体外培养的小肠上皮细胞和F17大肠埃希菌为研究对象,根据黏附后培养过夜的菌落数,调整黏附时间与感染复数(MOI),获取最佳黏附条件,初步建立F17大肠埃希菌黏附小肠上皮细胞的细胞模型;利用实时荧光定量PCR分别检测F17大肠埃希菌黏附后及脂多糖(LPS)诱导后的白细胞介素(IL)-6、IL-8和IL-1β的表达情况来鉴定该模型。结果表明:F17大肠埃希菌黏附3 h与黏附1、2、4 h时,黏附MOI=100∶1与MOI=200∶1、400∶1、500∶1差异显著,即F17大肠埃希菌黏附MOI=100∶1、黏附时间3 h为最佳黏附条件;小肠上皮细胞免疫相关基因的表达量随黏附时间、诱导时间发生显著变化;与LPS诱导模型相比, F17大肠埃希菌黏附模型更能模拟细菌黏附细胞的生理状态,说明模型建立成功。

关 键 词:F17大肠埃希菌  湖羊  小肠上皮细胞  细胞模型  黏附  白细胞介素
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