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卡拉霉素在转基因黄籽油菜中的应用
引用本文:林呐 、刘列钊 、周清元 、孙伟 、陈历晨 、李加纳. 卡拉霉素在转基因黄籽油菜中的应用[J]. 西南大学学报(自然科学版), 2015, 37(11): 1-7
作者姓名:林呐 、刘列钊 、周清元 、孙伟 、陈历晨 、李加纳
作者单位:西南大学农学与生物科技学院,重庆,400715; 重庆市油菜工程技术研究中心,重庆400715
基金项目:国家自然科学基金项目(31171584);重庆市自然科学基金项目(cstc2011jjA80005);博士启动项目(10426020710930).
摘    要:为筛选出黄籽油菜遗传转化中卡拉霉素或卡拉霉素(kanamycin,Kan or km)最佳质量浓度,首先将油菜子叶接种在不同质量浓度Kan(0~180mg/L)的分化培养基上,结果发现Kan质量浓度小于60 mg/L有利于绿苗分化.然后在不同质量浓度Kan的分化培养基上对农杆菌侵染的下胚轴进行筛选,结果表明初代培养Kan质量浓度以20~40mg/L为宜,同样质量浓度继代培养后可获得抗性愈伤和转基因阳性苗.最后利用Kan抗性对转基因黄籽油菜后代进行研究,苗期到薹花期生长的植株进行叶片涂抹法筛选,Kan最适质量浓度为4g/L,时间为4~10d;T1代抗性分析、GUS染色分析、T1代籽粒的PCR检测说明转基因在T1代、T2代可遗传并出现分离.β-葡萄糖苷酸酶基因(GUS)和聚合酶链式反应(PCR)验证叶片涂抹进行Kan抗性筛选的方法准确性高,可达100%.

关 键 词:卡拉霉素; 转基因黄籽油菜; 抗性

Application of Kanamycin in Transgenic Yellow-Seeded Rape (Brassica napus L.)
LIN N,LIU Lie-zhao,ZHOU Qing-yuan,SUN Wei,CHEN Li-chen,LI Jia-na. Application of Kanamycin in Transgenic Yellow-Seeded Rape (Brassica napus L.)[J]. Journal of southwest university (Natural science edition), 2015, 37(11): 1-7
Authors:LIN N  LIU Lie-zhao  ZHOU Qing-yuan  SUN Wei  CHEN Li-chen  LI Jia-na
Abstract:
Keywords:
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