| 副结核分枝杆菌MAP1068胞外蛋白酶的特性研究 |
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| 引用本文： | 王忠星,党光辉,刘虹秀,臧鑫鑫,崔莹莹,崔子寅,宋宁宁,陈利苹,刘思国.副结核分枝杆菌MAP1068胞外蛋白酶的特性研究[J].中国预防兽医学报,2019(5):505-508. |
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| 作者姓名： | 王忠星 党光辉 刘虹秀 臧鑫鑫 崔莹莹 崔子寅 宋宁宁 陈利苹 刘思国 |
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| 作者单位： | 吉林农业大学动物科学技术学院;中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室 |
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| 基金项目： | 牛羊重要疫病免疫防控新技术研究/牛羊疫苗新型佐剂及工艺研究(2017YFD0500906);黑龙江省青年科学基金项目(QC201834) |
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| 摘 要： | 为研究副结核分枝杆菌(MAP)1068蛋白的特性,本研究以MAP参考株K10基因组为模板,PCR扩增其map1068基因,构建p ET28a-map1068重组载体,将其转化BL21后诱导表达并纯化MAP1068蛋白。利用纯化的重组蛋白免疫(100μg/只/0.1 m L)小鼠制备多克隆抗体,应用该抗体对MAP1068蛋白进行亚细胞定位。以酪蛋白为底物测定MAP1068蛋白的酶活性。结果显示,MAP1068蛋白以包涵体形式表达;经变性、复性、亲和层析纯化后获得目的蛋白;将该蛋白免疫小鼠后其血清抗体效价可达1∶204 800;该蛋白主要定位于MAP细胞壁,可降解酪蛋白,为胞外蛋白酶。本实验为进一步研究MAP的致病机制奠定了基础。
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| 关 键 词： | 副结核分枝杆菌 MAP1068 特性 酶活性 |
The activity of extracellular MAP1068 protease from Mycobacterium avium subsp. Paratuberculosis |
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| WANG Zhong-xing,DANG Guang-hui,LIU Hong-xiu,ZANG Xin-xin,CUI Ying-ying,CUI Zi-yin,SONG Ning-ning,CHEN Li-ping,LIU Si-guo.The activity of extracellular MAP1068 protease from Mycobacterium avium subsp. Paratuberculosis[J].Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine,2019(5):505-508. |
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| Authors: | WANG Zhong-xing DANG Guang-hui LIU Hong-xiu ZANG Xin-xin CUI Ying-ying CUI Zi-yin SONG Ning-ning CHEN Li-ping LIU Si-guo |
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| Institution: | (College of Animal Science and Technology,Jilin Agricultural University,Changchun 130118,China;State Key Laboratory of Veterinary Biotechnology,Harbin Veterinary Research Institute,Chinese Academy of Agricultural Sciences,Harbin 150069,China) |
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| Abstract: | WANG Zhong-xing;DANG Guang-hui;LIU Hong-xiu;ZANG Xin-xin;CUI Ying-ying;CUI Zi-yin;SONG Ning-ning;CHEN Li-ping;LIU Si-guo(College of Animal Science and Technology,Jilin Agricultural University,Changchun 130118,China;State Key Laboratory of Veterinary Biotechnology,Harbin Veterinary Research Institute,Chinese Academy of Agricultural Sciences,Harbin 150069,China) |
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| Keywords: | Mycobacterium avium subsp Paratuberculosis MAP1068 characteristics enzymatic activity |
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