| 牛传染性鼻气管炎病毒恒温隔绝式荧光PCR检测方法的建立 |
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| 引用本文： | 张颖慧,岳华,汤承,黄建德.牛传染性鼻气管炎病毒恒温隔绝式荧光PCR检测方法的建立[J].中国预防兽医学报,2019(6):601-604,640. |
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| 作者姓名： | 张颖慧 岳华 汤承 黄建德 |
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| 作者单位： | 西南民族大学生命科学与技术学院;青藏高原动物遗传资源保护与利用教育部重点实验室;金瑞鸿捷（厦门）生物科技有限公司 |
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| 基金项目： | 四川省应用基础项目(2017JY0066);国家民委青藏高原动物疫病防控创新团队项目(13TD0057) |
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| 摘 要： | 为建立检测牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV)的恒温隔绝式荧光PCR(iiPCR)方法,本研究采用文献报道的引物和探针,通过优化反应体系,首次建立了检测IBRV核酸的iiPCR方法。结果显示该方法仅特异性检测出IBRV,而对牛病毒性腹泻-黏膜病病毒、牛副流感3型病毒、牛呼吸道合胞体病毒、牛腺病毒3型、牛冠状病毒、牛支原体、多杀性巴氏杆菌和溶血性曼氏杆菌等病原则不能检出。该方法的检测下限为2.4拷贝/μL质粒标准品,并具有良好的重复性。对临床样品的检测结果与OIE推荐的荧光定量PCR方法的检测结果一致;该方法配合PetNAD核酸萃取试剂盒,从核酸提取到报告检测结果仅需1h,具有操作简便、快速、可现地化的特点。对9个省29份商品化冻精检测结果显示,IBRV阳性率为24%(7/29),表明我国流通的商品化冻精携带IBRV情况普遍。本研究为IBRV的现地检测提供了一个可靠的方法。
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| 关 键 词： | 牛传染性鼻气管炎病毒 恒温隔绝式荧光PCR方法 现地检测 精液 |
Development and application of an insulated isothermal PCR(iiPCR) for on-site detecting infectious bovine rhinotracheitis virus |
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| ZHANG Ying-hui,YUE Hua,TANG Cheng,HUANG Jian-de.Development and application of an insulated isothermal PCR(iiPCR) for on-site detecting infectious bovine rhinotracheitis virus[J].Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine,2019(6):601-604,640. |
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| Authors: | ZHANG Ying-hui YUE Hua TANG Cheng HUANG Jian-de |
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| Institution: | (College of Life Science and Technology,Southwest Minzu University,Chengdu 610041,China;Key Laboratory of Qinghai-Tibetan Plateau Animal Genetic Resource Reservation and Utilization,Chengdu 610041,China;GeneRadar Biotechnology Corp.(Xiamen),Xiamen 361000,China) |
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| Abstract: | ZHANG Ying-hui;YUE Hua;TANG Cheng;HUANG Jian-de(College of Life Science and Technology,Southwest Minzu University,Chengdu 610041,China;Key Laboratory of Qinghai-Tibetan Plateau Animal Genetic Resource Reservation and Utilization,Chengdu 610041,China;GeneRadar Biotechnology Corp.(Xiamen),Xiamen 361000,China) |
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| Keywords: | infectious bovine rhinotracheitis virus insulated isothermal PCR detection on-site semen |
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