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阿卡斑病毒竞争ELISA抗体检测方法的建立和比较试验
引用本文:苗海生,李乐,廖德芳,寇美玲,朱建波,肖雷,孟锦昕,杨恒,李华春.阿卡斑病毒竞争ELISA抗体检测方法的建立和比较试验[J].中国预防兽医学报,2019(4):371-375.
作者姓名:苗海生  李乐  廖德芳  寇美玲  朱建波  肖雷  孟锦昕  杨恒  李华春
作者单位:云南省畜牧兽医科学院云南省热带亚热带动物病毒病重点实验室
基金项目:云南省技术创新人才培养对象(2018HB076);国家重点研发计划(2016YFD0500908);云南省应用基础研究计划(2015FD065)
摘    要:为建立阿卡斑病毒抗体检测方法,本研究以纯化的阿卡斑病毒作为包被抗原,以制备的抗阿卡斑病毒的多克隆抗体与待检血清竞争结合抗原,采用方阵滴定法优化反应条件,建立了阿卡斑病毒竞争ELISA(cELISA)抗体检测方法。通过对60份牛、羊阿卡斑病毒抗体阳性血清和40份阴性血清样品的检测,确定阴阳性样品抑制率(PI)临界值为60%;特异性试验结果显示,该方法对BTV-1、BTV-4、BTV-9、BTV-16、小反刍兽疫、中山病病毒、鹿流行性出血热病毒(EHDV)、羊痘和O型、A型、Asia-1型口蹄疫病毒阳性血清无交叉反应;敏感性试验结果显示,标准阳性血清1颐128倍稀释时,检测结果仍为阳性,SNT最低检出为,敏感性高于微量血清中和试验(SNT)检测结果(1颐64);批内和批间变异系数(CV)在0.54%~5.27%和0.3%~9.3%之间,具有较好的可重复性;用该方法与法国IDVET公司的同类试剂盒对85份牛、羊血清样品同时检测,结果显示二者符合率为91.76%,可以替代进口同类产品。本研究建立的检测方法特异性强、敏感性高、重复性好,可以用于阿卡斑病毒抗体检测和流行病学调查。

关 键 词:阿卡斑病毒  CELISA  抗体检测

Establishment and comparison of the competitive ELISA for detection of the antibody against Akabane virus
MIAO Hai-sheng,LI Le,LIAO De-fang,KOU Mei-ling,ZHU Jian-bo,XIAO Lei,MENG Jin-xin,YANG Heng,LI Hua-chun.Establishment and comparison of the competitive ELISA for detection of the antibody against Akabane virus[J].Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine,2019(4):371-375.
Authors:MIAO Hai-sheng  LI Le  LIAO De-fang  KOU Mei-ling  ZHU Jian-bo  XIAO Lei  MENG Jin-xin  YANG Heng  LI Hua-chun
Institution:(Yunnan Animal Science and Veterinary Institute,Kunming,Yunnan Tropical and Subtropical Animal Virus Disease Laboratory,Kunming 650224,China)
Abstract:MIAO Hai-sheng;LI Le;LIAO De-fang;KOU Mei-ling;ZHU Jian-bo;XIAO Lei;MENG Jin-xin;YANG Heng;LI Hua-chun(Yunnan Animal Science and Veterinary Institute,Kunming,Yunnan Tropical and Subtropical Animal Virus Disease Laboratory,Kunming 650224,China)
Keywords:Akabane virus  cELISA  antibody detection
本文献已被 CNKI 维普 等数据库收录!
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