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胭脂萝卜RsCHS1基因克隆及表达分析
作者姓名:王川艺  黄红涛  陈发波  郑张飞  方平
作者单位:1. 重庆三峡学院生物与食品工程学院;2. 长江师范学院现代农业与生物工程学院
基金项目:重庆市教委科学技术研究重点项目(KJZD-K202101404);;重庆市自然科学基金面上项目(cstc2021jcyj-msxmX0083);
摘    要:为解析RsCHS1基因在胭脂萝卜色素积累中的作用,以胭脂萝卜肉质根肉质cDNA为模板,同源克隆了RsCHS1基因的开放阅读框(ORF),采用生物信息学方法对RsCHS1蛋白的理化性质进行分析。利用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)分析了RsCHS1基因在胭脂萝卜营养期叶、肉质根肉质和肉质根皮及花期花、荚果和肉质根肉质中的表达情况,同时构建RsCHS1基因过表达载体,异源转化拟南芥,进行RsCHS1基因功能验证。结果表明,克隆得到2个RsCHS1基因,其中RsCHS1-a基因ORF序列长765 bp,编码254个氨基酸;RsCHS1-b基因ORF序列长966 bp,编码321个氨基酸。编码蛋白二、三级结构预测显示,α-螺旋是RsCHS1主要结构元件,β-转角、片层结构、无规则卷曲分布于整个蛋白质中。qRTPCR结果表明,RsCHS1-a基因在肉质根肉质(26.8)、根皮(32.4)和花(6.7)中的相对表达量比叶(1.0)和果实(0.4)中高,RsCHS1-b基因在肉质根肉质(41.4)、根皮(41.9)和花(9.7)中的相对表达量比叶(1.0)和果实(0.6)中高,说明RsCHS1基...

关 键 词:胭脂萝卜  查尔酮合成酶基因(CHS)  克隆  表达模式  花青素
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