| 猪圆环病毒2型SYBR—Green 1实时荧光定量PCR检测方法的建立 |
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| 引用本文： | 贾艳艳,李明凤,王东方. 猪圆环病毒2型SYBR—Green 1实时荧光定量PCR检测方法的建立[J]. 西北农林科技大学学报(自然科学版), 2009, 37(3): 82-86 |
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| 作者姓名： | 贾艳艳 李明凤 王东方 |
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| 作者单位： | 贾艳艳,王东方,崔保安,陈红英,吕晓丽,郭显坡,JIA Yan-yan,WANG Dong-fang,CUI Bao-an,CHEN Hong-ying,Lu Xiao-li,GUO Xian-po(河南农业大学,牧医工程学院,河南,郑州,450002;河南省动物性食品安全重点实验室,河南,郑州,450002);李明凤,魏战勇,LI Ming-feng,WEI Zhan-yong(河南农业大学,牧医工程学院,河南,郑州,450002) |
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| 基金项目： | 河南省杰出人才创新基金 |
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| 摘 要： | 【目的】建立一种能够快速、灵敏地检测猪圆环病毒2型(PCV2)的SYBR-Green 1实时荧光定量PCR方法。【方法】根据已报道的PCV2ORF2基因组序列,设计并合成1对引物。通过常规PCR扩增PCV2ORF2基因,将鉴定正确的ORF2基因片段克隆入pTG19-T载体中,转化大肠杆菌JM109,经PCR及测序鉴定后得到阳性重组质粒,作为标准品模板建立SYBR-Green 1荧光定量PCR标准曲线和溶解曲线,并做灵敏性、特异性和重复性试验。【结果】PCV2荧光定量PCR标准曲线循环阈值与模板浓度呈良好的线性关系,溶解曲线特异,相关系数为0.9988,最低检测的拷贝数为1拷贝/25μL,特异性和重复性较好。【结论】建立了检测PCV2的SYBR-Green 1荧光定量PCR方法,为该病的早期诊断及定量分析PCV2感染程度奠定了基础。
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| 关 键 词： | 猪圆环病毒2型(PCV2) SYBR-Green1 实时定量PCR PCR检测方法 |
| 收稿时间： | 2008-05-13 |
Development of a SYBR-Green 1 real-time fluorescent quantitative PCR method for detection of type 2 porcine circovirus |
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| JIA Yan-yan,LI Ming-feng,WANG Dong-fang,CUI Bao-an,CHEN Hong-ying,WEI Zhan-yong,Lu Xiao-li,GUO Xian-po. Development of a SYBR-Green 1 real-time fluorescent quantitative PCR method for detection of type 2 porcine circovirus[J]. Journal of Northwest A&F University（Natural Science Edition）, 2009, 37(3): 82-86 |
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| Authors: | JIA Yan-yan LI Ming-feng WANG Dong-fang CUI Bao-an CHEN Hong-ying WEI Zhan-yong Lu Xiao-li GUO Xian-po |
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| Affiliation: | 1,2(1 The College of Animal Husbandry andVeterinary,Henan Agricultural University,Zhengzhou,Henan 450002,China;2 Henan Animal Food Safety Key Labrotorary,Zhengzhou,Henan 450002,China) |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | SYBR-Greenl |
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