熔融尿素法提取羊毛角蛋白机制

为了探明羊毛角蛋白在熔融尿素中溶解的原理,首先采用SDS-PAGE电泳法测定了溶解羊毛角蛋白的分子质量。其次分别使用香草醛、香草醇、香草酸、乙酰香草醛、甲酰香草酸、4-乙酰-3-甲酰芥子酸、水杨酰苯胺、3,3-二羟基二苯二硫醚、苯胺、酪氨酸等标准化合物替代羊毛角蛋白中的官能团及化学键,与尿素在150℃下反应20 min,经乙酸乙酯分液3次,有机层脱水浓缩,丙酮溶解,GC-MS分析;水层冷冻干燥,乙酰化,浓缩,GC-MS分析。结果显示,溶解羊毛角蛋白的分子质量为75 ku,以较高分子状态存在。醛基脱离,酯键只脱离乙酰基,羧基脱离或者与尿素结合,醇羟基和氨基与尿素结合,肽键、二硫键不断裂。羊毛在熔融尿素中溶解是氢键的断裂、官能团的脱离、尿素向官能团结合等几个主要途径来完成的,羊毛角蛋白的一级结构没有被破坏,仍然以较高分子状态存在。酪氨酸的氨基和羧基均跟尿素反应形成环化结构,才能溶于有机溶剂中,并从GC-MS的分析中能检测。所有标准化合物与尿素反应产物的水层中,既没有原料转变的化合物,也没有原料本身,有必要改善试验方法进行进一步的研究。