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杂交兰尿卟啉原脱羧酶基因的克隆及其表达分析
引用本文:林榕燕,吴建设,林兵,叶秀仙,钟淮钦,黄敏玲.杂交兰尿卟啉原脱羧酶基因的克隆及其表达分析[J].核农学报,2020,34(9):1898-1905.
作者姓名:林榕燕  吴建设  林兵  叶秀仙  钟淮钦  黄敏玲
作者单位:福建省农业科学院作物研究所/福建省农业科学院花卉研究中心/福建省特色花卉工程技术研究中心,福建 福州 350013
基金项目:福建省省属公益类科研院所专项;福建省农业科学院科技创新团队;福建省农业科学院博士基金;福建省自然科学基金项目
摘    要:尿卟啉原脱羧酶(UROD)是植物叶绿素、光敏色素和血红素合成中的一个关键酶。为了深入研究UROD基因的功能及其在杂交兰叶艺形成中的作用,本研究在转录组测序基础上,以杂交兰紫妍氏(K21)及其叶艺品系爪艺紫妍氏(K21-1)为试验材料,克隆ChUROD基因,分析其序列信息,利用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测该基因在不同组织及不同品种叶片中的表达情况,并对相关生理指标进行测定。结果表明,ChUROD基因编码区序列长1 191 bp,编码396个氨基酸;该蛋白质分子量约为43.78 kD,属于URO-D-CIMS-like家族蛋白;系统进化分析表明,杂交兰ChUROD与墨兰UROD的亲缘关系最近。qRT-PCR分析结果显示,ChUROD在K21叶中的相对表达量显著高于茎和根,且显著高于K21-1叶中的相对表达量。对杂交兰UROD酶浓度、尿卟啉原Ⅲ、粪卟啉原Ⅲ含量及叶绿素含量的测定结果显示,UROD酶浓度与其基因的相对表达量分布趋势相似。在K21-1 中,尿卟啉原Ⅲ脱羧产生粪卟啉原Ⅲ的过程受阻,尿卟啉原Ⅲ在黄叶区叶片大量积累;叶绿素a、叶绿素b在黄叶区叶片中合成受阻,且二者含量显著低于K21和K21-1绿叶区叶片。由此可见,ChUROD基因可能在杂交兰叶艺形成中发挥重要作用。本研究结果为杂交兰ChUROD基因的功能验证和叶艺形成机制研究提供了参考依据。

关 键 词:杂交兰  UROD基因  克隆  qRT-PCR  
收稿时间:2020-01-08

Cloning and Expression Analysis of Uroporphyrinogen Decarboxylase Gene From Cymbidium Hybrid
LIN Rongyan,WU Jianshe,LIN Bing,YE Xiuxian,ZHONG Huaiqin,HUANG Minling.Cloning and Expression Analysis of Uroporphyrinogen Decarboxylase Gene From Cymbidium Hybrid[J].Acta Agriculturae Nucleatae Sinica,2020,34(9):1898-1905.
Authors:LIN Rongyan  WU Jianshe  LIN Bing  YE Xiuxian  ZHONG Huaiqin  HUANG Minling
Institution:Crops Research Institute, Flower Research Center, Fujian Academy of Agricultural Sciences/Fujian Engineering Research Center for Characteristic Floriculture, Fuzhou, Fujian 350013
Abstract:
Keywords:Cymbidium hybrid  UROD gene  cloning  qRT-PCR  
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