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A型口蹄疫病毒VP3基因的克隆及原核表达
引用本文:刘航,杨晓燕,刘明,赵海波,郭华花,田永强.A型口蹄疫病毒VP3基因的克隆及原核表达[J].江苏农业科学,2012,40(6):33-35.
作者姓名:刘航  杨晓燕  刘明  赵海波  郭华花  田永强
作者单位:兰州交通大学化学与生物工程学院,甘肃兰州,730070
摘    要:从实验室冻存的含A型口蹄疫病毒的细胞中提取FMDV总RNA,通过RT- PCR获得cDNA.并根据FM-DV全基因组序列设计了1对针对VP3基因的引物,通过PCR扩增得到目的基因VP3并亚克隆入pMD 18-T载体.将鉴定出的阳性质粒和表达载体PET32a用BamH Ⅰ、HindⅢ双酶切回收后连接,获得阳性重组质粒PET32-VP3.用IPTG诱导重组质粒表达目的蛋白VP3,并用SDS - PAGE进行检测,表达产物用镍亲和树脂进行纯化.结果证明口蹄疫病毒VP3蛋白在大肠杆菌中获得了高效表达且表达产物得到了纯化,为实验室进一步研究提供了重要的材料.

关 键 词:A型口蹄疫病毒  VP3基因  克隆  原核表达
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