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| 七带石斑鱼神经坏死病毒的RT-LAMP检测方法 | |
| 作者单位： | ;1.中国水产科学研究院黄海水产研究所;2.青岛市鱼类种子工程与生物技术重点实验室;3.浙江海洋学院;4.莱州明波水产有限公司 |
| 摘 要： | 报道了一种可以快速、灵敏地检测七带石斑鱼神经坏死病毒(NNV)的逆转录环介导等温扩增方法(RT-LAMP)。该方法参考赤点石斑鱼NNV病毒的主衣壳蛋白(MCP)基因的保守序列,设计1对引物克隆出七带石斑鱼NNV的基因序列,利用Primer Explorer V4软件设计了3对针对所克隆NNV基因序列的特异性引物,建立了RT-LAMP的反应体系,并分别对反应系统的引物浓度、反应温度和时间进行了优化,形成了七带石斑鱼NNV病毒RT-LAMP检测技术。实践应用结果表明,在63℃的最佳反应温度下,采用RT-LAMP检测技术经过45 min就能完成一次检测,准确率达到100%。本研究建立的RT-LAMP检测NNV技术设备要求简单,为七带石斑鱼等石斑鱼无NNV受精卵和仔稚鱼的生产现场检测和筛选提供了一种方便、灵敏的检测方法。 |
| 关 键 词： | 七带石斑鱼 神经坏死病毒 检测 RT-LAMP |
Establishment and Application of Loop-Mediated Isothermal Amplification for Fast Detection of Sevenband Grouper Nervous Necrosis Virous |
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| Abstract: | |
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