| 杨树基因组SRAP扩增体系的建立与优化 |
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| 引用本文： | 谭碧玥,王源秀,徐立安. 杨树基因组SRAP扩增体系的建立与优化[J]. 林业科技开发, 2009, 23(2) |
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| 作者姓名： | 谭碧玥 王源秀 徐立安 |
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| 作者单位： | 1. 南京林业大学森林资源与环境学院,南京,210037
2. 安徽师范大学 |
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| 摘 要： | 以响叶杨和银白杨及F1代为实验材料,利用正交设计直观分析法和单因素随机试验对杨树SRAP反应体系中各组分(TaqDNA聚合酶、dNTP、引物和Mg2+)的浓度进行优化;通过实验确定10μL反应体系为:引物0.35μmol/L,TaqDNA聚合酶0.5U,dNTP0.2 mmol/L,Mg2+2.0 mmol/L,10×PCRbuffer 1μL,模板DNA 1μl(20 ng/μL).同时利用最佳反应体系以及正交设计直观分析法对PCR扩增程序进行筛选,并通过梯度PCR试验,确定引物最佳退火温度.结果表明最佳反应程序为:开始94℃变性5min,反应前5个循环在94℃1 min,37℃30 s,72℃ 1min条件下运行;之后35个循环在94℃1 min,54℃ 1 min,72℃ 1 min条件下运行,最后延伸7 min;12℃保存.并利用两树种的杂种F1代对优化的反应体系和程序的可行性进行了验证.
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| 关 键 词： | 响叶杨 银白杨 正交设计 |
Establishment and Optimization of SRAP-PCR Reaction System of Populus |
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| TAN Bi-yue,WANG Yuan-xiu,XU Li-an. Establishment and Optimization of SRAP-PCR Reaction System of Populus[J]. China Forestry Science and Technology, 2009, 23(2) |
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| Authors: | TAN Bi-yue WANG Yuan-xiu XU Li-an |
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| Affiliation: | TAN Bi-yue,WANG Yuan-xiu,XU Li-an College of Forest Resources , Environment,Nanjing Forestry University,210037 Nanjing,China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | SRAP |
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