小鼠胎鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞的分离、原代培养及鉴定 |
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引用本文: | 陈坤,邓世雄,刘芳君,李虹,蒋朴.小鼠胎鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞的分离、原代培养及鉴定[J].西南农业大学学报,2011,33(12). |
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作者姓名: | 陈坤 邓世雄 刘芳君 李虹 蒋朴 |
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作者单位: | 重庆医科大学基础医学院法医学教研室;重庆医科大学附属儿童医院;儿童发育疾病研究省部共建教育部重点实验室;重庆市公安局江北分局; |
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基金项目: | 国家自然科学基金资助项目(30772459) |
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摘 要: | 目的:建立系统可靠的小鼠胎鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞的分离、培养、纯化及鉴定技术,为进一步研究肺纤维化及肺肿瘤等疾病的发病机制奠定基础.方法:应用低质量分数胰酶联合胶原酶的方法消化小鼠胎鼠肺组织块,经差速离心和差速贴壁的方法纯化肺泡Ⅱ型上皮,进行原代培养.用改良巴氏染色法和透射电镜观察对所分离的细胞进行鉴定.结果:每只胎鼠可获得(5±2)×106的细胞产量,细胞活力为95%±2%,纯度达到92%±2%,改良巴氏法镜下观察可见胞质内含较多深色颗粒,透射电镜观察到特征性的嗜锇小体即板层小体和细胞膜上有明显的微绒毛.结论:该方法能成功分离出小鼠胎鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞,且产量大、纯度高,能满足体外研究的需要.
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关 键 词: | 胎鼠 肺泡Ⅱ型上皮细胞 原代培养 鉴定 |
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