| 凡纳滨对虾Crustin-like基因的克隆及在副溶血弧菌感染条件下的表达分析 |
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| 引用本文： | 张艳艳,刘小林,黄海洪.凡纳滨对虾Crustin-like基因的克隆及在副溶血弧菌感染条件下的表达分析[J].西北农林科技大学学报(社会科学版),2012,40(12):41-48. |
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| 作者姓名： | 张艳艳 刘小林 黄海洪 |
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| 作者单位： | 西北农林科技大学 动物科技学院，陕西省农业分子生物学重点实验室;西北农林科技大学 动物科技学院，陕西省农业分子生物学重点实验室;西北农林科技大学 动物科技学院，陕西省农业分子生物学重点实验室 |
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| 基金项目： | 国家“863”高新技术研究与发展计划项目（2006AA10A406）；中国科学院实验海洋生物学重点实验室开放课题（Kf201002）；科技部农业科技成果转化基金项目(2012GB2E200361) |
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| 摘 要： | 【目的】研究凡纳滨对虾Crustin-like基因(即CL基因)的结构和功能,探明CL基因是否参与副溶血弧菌侵染条件下的免疫应答,为进一步研究凡纳滨对虾的免疫机制和抗病育种奠定基础。【方法】采用RT-PCR技术克隆凡纳滨对虾CL基因;用DNAstar、Clustalx、MEGA 5.0、PROSITE、TMpred和SignalP软件,分析CL基因序列及其蛋白结构,并预测蛋白功能;利用副溶血弧菌进行攻毒试验和实时定量PCR,检测CL基因在病原侵染条件下的表达情况。【结果】克隆获得了凡纳滨对虾CL基因(登录号:JQ824114)的cDNA,全长为501bp,含有33bp的5′非翻译区(1～33bp)和24bp的3′非翻译区(478～501bp),编码区为444bp,共编码147个氨基酸;对CL蛋白结构及功能的分析表明,该蛋白编码蛋白质含有1个信号肽、1个跨膜螺旋和1个WAP结构域;攻毒试验表明,副溶血弧菌刺激可导致CL基因表达量的明显变化,总体呈现出先降低后升高的变化趋势。【结论】克隆了凡纳滨对虾CL基因的全长,发现其与副溶血弧菌侵入后引发的免疫反应密切相关,可以作为副溶血弧菌感染前期诊断的参考指标。
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| 关 键 词： | 凡纳滨对虾 Crustin-like基因 序列分析 副溶血弧菌 实时定量PCR |
Molecular cloning of Crustin-like gene in the white shrimp(Litopenaeus vannamei) and its mRNA expression with Vibrio parahaemolyticus challenge |
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| ZHANG Yan-yan,LIU Xiao-lin,HUANG Hai-hong,QIAN Zhao-ying,WANG Xian-zong,XIANG Jian-hai,LI Yi-jun.Molecular cloning of Crustin-like gene in the white shrimp(Litopenaeus vannamei) and its mRNA expression with Vibrio parahaemolyticus challenge[J].Journal of Northwest Sci-Tech Univ of Agr and,2012,40(12):41-48. |
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| Authors: | ZHANG Yan-yan LIU Xiao-lin HUANG Hai-hong QIAN Zhao-ying WANG Xian-zong XIANG Jian-hai LI Yi-jun |
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| Institution: | 1 College of Animal Science and Technology,Northwest A&F University,Shaanxi Key Laboratory of Molecular Biology for Agriculture, Yangling,Shaanxi 712100,China;2 Experimental Marine Biology Laboratory,Institute of Oceanology,Chinese Academy of Sciences, Qingdao,Shandong 266071,China;3 Nanjiang Marine Biotechnology Company Limited,Sanya,Hainan 572000,China) |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Litopenaeus vannamei Crustin-like gene sequence analysis Vibrio parahaemolyticus Real-time quantitative PCR |
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