| 独行菜法尼基焦磷酸合酶基因的克隆与原核表达 |
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| 引用本文： | 马利刚,赵乐,付小蝶,冯卫生,匡海学,郑晓珂.独行菜法尼基焦磷酸合酶基因的克隆与原核表达[J].河南农业科学,2017,46(9). |
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| 作者姓名： | 马利刚 赵乐 付小蝶 冯卫生 匡海学 郑晓珂 |
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| 作者单位： | 1. 河南中医药大学 药学院,河南 郑州 450046;呼吸疾病诊疗与新药研发河南省协同创新中心,河南 郑州 450046;2. 河南中医药大学 药学院,河南 郑州,450046;3. 黑龙江中医药大学 药学院,黑龙江 哈尔滨,150040 |
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| 基金项目： | 国家重点基础研究发展(973)计划项目，河南中医学院博士科研基金项目 |
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| 摘 要： | 从独行菜(Lepidium apetalum)中克隆强心苷合成途径的法尼基焦磷酸合酶(FPS)基因,并在大肠杆菌中表达,为进一步研究独行菜强心苷的合成途径提供参考。分析前期获得的独行菜幼苗转录组数据,选择其中注释为FPS且具有完整开放阅读框的序列,从独行菜叶片c DNA中通过PCR克隆该序列,并进行序列分析。结果表明,克隆得到独行菜FPS基因的cDNA序列,Gen Bank登录号KY366218,命名为La FPS。序列长度为1 332 bp,含有1 161 bp的开放阅读框,推测编码386个氨基酸。La FPS蛋白可能不含跨膜结构,定位于线粒体中,含有聚异戊二烯合成酶结构域。La FPS蛋白氨基酸序列与拟南芥(Arabidopsis thaliana)FPS1蛋白相似性高达92%,进化树分析结果表明,La FPS与同为十字花科的拟南芥FPS1、遏蓝菜(Noccaea caerulescens)FPS1、高山南芥(Arabis alpina)FPS亲缘关系最近。构建的载体p ET-32a-La FPS可在大肠杆菌中成功诱导表达。表明成功克隆了独行菜FPS基因,并建立了其原核表达体系。
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| 关 键 词： | 独行菜 法尼基焦磷酸合酶 基因克隆 序列分析 原核表达 |
Cloning and Prokaryotic Expression of Farnesyl Pyrophosphate Synthase Gene from Lepidium apetalum |
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| MA Ligang,ZHAO Le,FU Xiaodie,FENG Weisheng,KUANG Haixue,ZHENG Xiaoke.Cloning and Prokaryotic Expression of Farnesyl Pyrophosphate Synthase Gene from Lepidium apetalum[J].Journal of Henan Agricultural Sciences,2017,46(9). |
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| Authors: | MA Ligang ZHAO Le FU Xiaodie FENG Weisheng KUANG Haixue ZHENG Xiaoke |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Lepidium apetalum farnesyl pyrophosphate synthase gene cloning sequence analysis prokaryotic expression |
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