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| 猪繁殖与呼吸综合征3种毒株多重PCR检测方法的建立 | |
| 作者单位： | ;1.辽宁医学院畜牧兽医学院;2.吉林大学动物医学学院;3.营口市动物疫病预防控制中心;4.辽宁省阜蒙县畜牧技术推广站 |
| 摘 要： | 根据猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)基因序列设计2对特异性引物,第1对通用引物扩增美洲型经典毒株和变异毒株Nsp2基因(466bp/376bp),第2对引物特异性扩增欧洲型毒株ORF7基因(580bp)。反应条件优化后,建立了能够同时检测美洲型经典毒株、美洲型变异毒株和欧洲型毒株的多重PCR检测方法。该方法可以特异性扩增3种毒株的基因,目的基因片段大小差异在90bp以上便于电泳观察,重组质粒标准品检测下限为1.93×103拷贝。应用该方法检测183份临床疑似病例,结果 PRRSV阳性35份,其中美洲型经典株2份,美洲型变异株31份,欧洲型毒株3份,美洲型变异株和欧洲型毒株混合感染1份。表明建立的多重PCR检测方法具有快速、准确、敏感等优点,对PRRSV 3种毒株的快速诊断有十分重要的意义。 |
| 关 键 词： | 猪繁殖与呼吸综合征病毒 3种毒株 多重PCR 检测方法 |
Establishment of a multiplex PCR assay for differential detection of three strains of PRRSV |
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