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| 猪伪狂犬病毒和猪圆环病毒2型TaqMan-MGB双重荧光定量PCR检测方法的建立及应用 | |
| 作者单位： | ;1.福建省农业科学院畜牧兽医研究所;2.福建省畜禽疫病防治工程技术研究中心;3.福建省农业科学院生物技术研究所 |
| 摘 要： | 参照GenBank中猪伪狂犬病毒(PRV)gE基因以及猪圆环病毒2型(PCV2)中ORF2特异性序列,设计特异引物和TaqMan-MGB探针,通过优化反应条件,建立了同时检测PRV野毒株和猪圆环病毒(PCV2)的双重荧光定量PCR检测方法,并验证该方法的特异性、敏感性、重复性。结果表明,该方法检测PRV和PCV2灵敏度分别可达2.23×101、4.5×102拷贝/μL,均比常规PCR检测方法高100倍;同时检测猪瘟病毒(CSFV)、猪繁殖和呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪细小病毒(PPV)、均为阴性,无交叉反应;对30份疑似病料进行检测并与普通PCR进行比较,结果显示,二者检测PRV的总符合率为96.67%,检测PCV2的总符合率为93.33%。本试验建立的TaqMan-MGB双重荧光定量PCR检测方法可同时对PRV野毒株和PCV2进行早期快速诊断,可应用于病原学监测,流行病学调查等。 |
| 关 键 词： | 猪伪狂犬病毒 猪圆环病毒TaqMan-MGB 双重荧光定量PCR |
Development and application of a multiplex TaqMan-MGB quantitative PCR assay for detection and differentiation of pseudorabies virus and porcine circovirus type 2 |
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