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高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(JXA1-R株)微载体悬浮培养工艺研究
作者单位:;1.中国农业大学动物医学院;2.成都天邦生物制品有限公司;3.中国动物疫病预防控制中心
摘    要:为了建立高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(HP-PRRSV)的Marc-145微载体细胞悬浮培养工艺以提高HPPRRSV抗原效价,以BC-7L生物反应器微载体悬浮培养Marc-145细胞,对HP-PRRSV接毒时间、接毒剂量、维持液血清浓度、溶氧量参数、病毒增殖温度等工艺参数进行了摸索和优化。通过细胞悬浮培养逐级放大工艺,在BC-100L生物反应器中培养Marc-145细胞,以优化后HP-PRRSV悬浮培养工艺进行3个批次的病毒悬浮培养。结果在Marc-145细胞微载体悬浮培养的第4天按照感染复数(multiplicity of infection,MOI)为0.1的剂量接毒,接毒后以2%新生牛血清的维持液进行维持培养,溶氧参数设置为40%,最佳培养温度为37℃,最佳收获病毒时间为70~74 h。BC-100L生物反应器中培养的3批病毒增殖曲线与BC-7L培养的病毒增殖曲线相近,在接毒后72 h左右达到病毒效价高峰,病毒含量均不低于108.0TCID50/m L。表明HP-PRRSV悬浮培养工艺稳定,可以实现逐级放大、规模化生产。

关 键 词:高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒  微载体  生物反应器  悬浮培养

Study on the Process of Highly Pathogenic Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome Virus(HP-PRRSV JXA1-R strain) Microcarrier Suspension Culture
Abstract:
Keywords:
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