| 芦笋茎尖遗传转化体系的建立与优化 |
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| 引用本文： | 张 园,刘正杰,林 春,闫亚泽,袁加红,王 入,毛自朝,杨焕文.芦笋茎尖遗传转化体系的建立与优化[J].西北农业学报,2020,30(1):109-116. |
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| 作者姓名： | 张 园 刘正杰 林 春 闫亚泽 袁加红 王 入 毛自朝 杨焕文 |
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| 作者单位： | (1.云南农业大学 农学与生物技术学院,昆明 650201; 2.云南农业大学 特色小宗作物研究中心,昆明 650201; 3.云南农业大学 烟草学院,昆明 650201) |
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| 基金项目： | 云南省农业基础研究联合专项(2017FG001-002) ；云南省农业基础研究联合专项(2018FG001-019)。 |
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| 摘 要： | 通过优化根癌农杆菌 EHA105(含有pBI121表达载体)介导的茎尖遗传转化条件,包括抑菌抗生素类型及浓度、农杆菌浓度、侵染时间、共培养时间、卡那霉素浓度等影响因素,建立芦笋品种‘达宝利’遗传转化体系。以0.1～0.3 cm长的芦笋茎尖为转化受体,用MS液体培养基(MS+蔗糖3%+乙酰丁香酮150μmol·L~(-1))悬浮菌体至OD_(600)为0.6,侵染茎尖15 min,20℃避光共培养4 d;抗性茎尖在筛选培养基(1/2 MS+IBA 0.5mg·L~(-1)+KT 0.1mg·L~(-1)+嘧啶醇0.5mg·L~(-1)+羧苄青霉素200mg·L~(-1)+卡那霉素50mg·L~(-1))上诱导长芽与生根,可获得抗性植株,经PCR、 GUS组织化学染色和qRT-PCR检测,获得阳性植株。
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| 关 键 词： | 芦笋 茎尖 遗传转化 参数优化 GUS qRT-PCR |
Establishment and Optimization of High Efficient Genetic Transformation System of Asparagus |
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| ZHANG Yuan,LIU Zhengjie,LIN Chun,YAN Yaze,YUAN Jiahong,WANG Ru,MAO Zichao and YANG Huanwen.Establishment and Optimization of High Efficient Genetic Transformation System of Asparagus[J].Acta Agriculturae Boreali-occidentalis Sinica,2020,30(1):109-116. |
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| Authors: | ZHANG Yuan LIU Zhengjie LIN Chun YAN Yaze YUAN Jiahong WANG Ru MAO Zichao and YANG Huanwen |
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