| 与HEp-2细胞粘附现象相关的大肠杆菌O157基因的发现 |
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| 引用本文： | 韩烨,周志江,张玉静. 与HEp-2细胞粘附现象相关的大肠杆菌O157基因的发现[J]. 中国兽医学报, 2005, 25(3): 266-269 |
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| 作者姓名： | 韩烨 周志江 张玉静 |
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| 作者单位： | 1. 吉林大学,畜牧兽医学院,吉林,长春,130062
2. 天津大学农业与生物工程学院,天津,300072 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目(39670563) |
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| 摘 要： | 将产志贺毒素大肠杆菌O157：H7菌株97094培养于含有不同质量浓度的萘啶酮酸(nalidixie acid，NA)的麦康凯(MacConkey)琼脂平板上，获得对NA有抗性的菌株。用含有自杀性质粒pRT733的供体菌SM10λpir(携带转座子TnphoA)和抗萘啶酮酸的97094菌株做接合试验，使转座子TnphoA转入受体菌97094，经过约200个接合试验，有503个菌株在含有Km、NA、XP的LB琼脂平板上形成蓝色菌落，说明在这些菌株中形成了phoA融合基因,并能表达phoA基因。在这503个Km^r，NA^r变异体中，有6株完全失去了对HEp-2细胞的局灶型粘附(local adherence,LA)现象。对构建的6株大肠杆菌O157 TnphoA变异体，克隆TnphoA及其两侧的大肠杆菌O157 DNA序列，用根据TnphoA融合接点处的phoA的DNA序列设计合成的寡核苷酸引物，对各克隆中TnphoA上游的大肠杆菌O157的DNA片段部分进行测序，测序结果做BLAST搜索，发现有4个变异体的TnphoA插入到已知的大肠杆菌O157紧密素基因eae中，有2个变异体的TnphoA分别插入到eae之外的核苷酸序列中，分别插入到一个功能未知的菌毛分子伴侣基因和一个功能未知的Z4182基因的上游。这项研究表明，除紧密素外，大肠杆菌O157尚有其他因子参与对真核细胞的粘附。
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| 关 键 词： | 细胞粘附 大肠杆菌O157：H7 HEp-2细胞 DNA序列 相关 萘啶酮酸 琼脂平板 DNA片段 BLAST 核苷酸序列 变异体 质量浓度 志贺毒素 acid 融合基因 寡核苷酸 设计合成 分子伴侣 真核细胞 转座子 菌株 pir 受体菌 插入 试验 接合 |
| 文章编号： | 1005-4545(2005)03-0266-04 |
| 修稿时间： | 2004-01-19 |
Genes of Escherichia coli O157 Associated with Adherence to HEp-2 Cells |
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| HAN Ye,ZHOU Zhi-jiang,ZHANG Yu-jing. Genes of Escherichia coli O157 Associated with Adherence to HEp-2 Cells[J]. Chinese Journal of Veterinary Science, 2005, 25(3): 266-269 |
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| Authors: | HAN Ye ZHOU Zhi-jiang ZHANG Yu-jing |
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| Affiliation: | HAN Ye1,ZHOU Zhi-jiang~2*,ZHANG Yu-jing1 |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Escherichia coli O157 HEp-2 cells adherence TnphoA mutants DNA sequence analysis |
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