| 猪白细胞介素-2在甲醇酵母中的表达 |
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| 引用本文： | 严琳,陈焕春,覃雅丽,何启盖,肖少波.猪白细胞介素-2在甲醇酵母中的表达[J].畜牧兽医学报,2004,35(2):208-212. |
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| 作者姓名： | 严琳 陈焕春 覃雅丽 何启盖 肖少波 |
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| 作者单位： | 华中农业大学畜牧兽医学院动物病毒室,武汉,430070 |
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| 基金项目： | 国家863高技术研究和发展计划项目基金(2001AA213051) |
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| 摘 要： | 将猪白细胞介素-2(pIL-2)的完整cDNA序列克隆到甲醇酵母(Pichiapastoris)表达载体pPIC3 5K中,在E.coli体系中鉴定得到阳性克隆子pPIC3 5K-IL2。将pPIC3 5K-IL2经SacI线性化后,转化入经LiC1致敏的P.PastorisGS115菌株中,得到的重组菌株经1%浓度甲醇诱导后,利用SDS-PAGE电泳,斑点杂交及去糖基化酶消化证实,在培养上清中获得了分泌型表达的猪白细胞介素-2(蛋白分子量约为20KD),其表达量可达到80mg/L。用CTLL-2细胞进行活性检测,生物学活性可达2×106IU/ml。对其表达情况进行时间梯度分析,确定第5天表达量达到最高点,为最佳诱导时间;分析连续4个批次的重组菌株表达情况,结果表明重组菌株在适当菌体浓度下连续培养均能稳定、高效的表达外源蛋白pIL-2。本实验为进一步大规模生产pIL-2提供了理论依据。
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| 关 键 词： | 猪 白细胞介素-2 甲醇酵母 基因表达 阳性克隆子 |
| 文章编号： | 0366-6964(2004)02-0208-05 |
The Expression of Porcine Interleukin-2 in Pichia Pastoris |
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| YAN Lin,CHEN Huan- chun,QIN Ya- li,HE Qi- gai,XIAO Shao- bo.The Expression of Porcine Interleukin-2 in Pichia Pastoris[J].Acta Veterinaria et Zootechnica Sinica,2004,35(2):208-212. |
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| Authors: | YAN Lin CHEN Huan- chun QIN Ya- li HE Qi- gai XIAO Shao- bo |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Porcine Interleukin- 2 Pichia pastoris Yeast expression |
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