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| 黄淮山羊骨形态发生蛋白4(BMP4)基因的克隆及优化表达 | |
| 引用本文： | 李明,石晓卫,陈其新,张弛,周建设,刘孟洲,赵巧辉. 黄淮山羊骨形态发生蛋白4(BMP4)基因的克隆及优化表达[J]. 中国兽医学报, 2010, 30(10) |
| 作者姓名： | 李明 石晓卫 陈其新 张弛 周建设 刘孟洲 赵巧辉 |
| 作者单位： | 1. 河南农业大学,牧医工程学院,河南,郑州,450002;甘肃农业大学,动物科技学院,甘肃,兰州,730070 2. 甘肃农业大学,动物科技学院,甘肃,兰州,730070;新乡医学院,河南,新乡,453003 3. 河南农业大学,牧医工程学院,河南,郑州,450002 4. 甘肃农业大学,动物科技学院,甘肃,兰州,730070 5. 甘肃农业大学,动物科技学院,甘肃,兰州,730070;郑州安图绿科生物工程有限公司,河南,郑州,450016 |
| 基金项目： | 河南省教育厅自然基金，河南省科技攻关项目 |
| 摘 要： | 根据GenBank公布的人和牛BMP4基因序列设计引物,通过RT-PCR和PCR方法分别扩增全长编码序列和内含子2、3,进行克隆及测序鉴定;根据已得到的序列设计引物扩增BMP4成熟蛋白cDNA,克隆入pET32a表达载体,转化E.coliBL21(DE3)plysS进行诱导表达,同时进行诱导条件的优化。结果显示,山羊BMP4基因全编码序列、内含子2和3序列长度分别为1 230、1 053、962 bp,与猪、人、小鼠和牛相应序列的同源性分别为:96.10%、94.96%、91.79%、99.19%,83.80%、76.03%、66.94%、96.71%和87.15%、80.24%、67.20%、98.13%。在E.coliBL21(DE3)plsS中表达的BMP4融合蛋白的相对分子量为31 000,适宜的诱导条件为:0.5 mmol/L IPTG、22℃、诱导8 h.结果表明,黄淮山羊BMP4基因全长编码序列和内含子2、3已被成功克隆。适宜表达条件的确定为进一步研究山羊BMP4的生物学功能奠定了基础。 |
| 关 键 词： | 黄淮山羊 BMP4 优化表达 |
Cloning and optimized expression of bone morphogenetic protein4(BMP4)gene in Huanghuai goat |
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| LI Ming,SHI Xiao-wei,CHEN Qi-xin,ZHANG Chi,ZHOU Jian-she,LIU Meng-zhou,ZHAO Qiao-hui. Cloning and optimized expression of bone morphogenetic protein4(BMP4)gene in Huanghuai goat[J]. Chinese Journal of Veterinary Science, 2010, 30(10) | |
| Authors: | LI Ming SHI Xiao-wei CHEN Qi-xin ZHANG Chi ZHOU Jian-she LIU Meng-zhou ZHAO Qiao-hui |
| Abstract: | |
| Keywords: | |
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