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| 表达虎源H_5N_1亚型禽流感病毒NP蛋白重组犬2型腺病毒的构建及鉴定 | |
| 引用本文： | 彭广能,耿长国,何春燕,汪开毓,夏咸柱,高玉伟,杨松涛,LIU Yi-一xin.表达虎源H_5N_1亚型禽流感病毒NP蛋白重组犬2型腺病毒的构建及鉴定[J].中国兽医学报,2010,30(12). |
| 作者姓名： | 彭广能 耿长国 何春燕 汪开毓 夏咸柱 高玉伟 杨松涛 LIU Yi-一xin |
| 作者单位： | 1. 四川农业大学动物医学院动物疫病与人类健康四川省重点实验室,四川雅安625014; 2. 军事医学科学院军事兽医研究所,吉林长春130062; 3. 动物医学院动物疫病与人类健康四Jil省重点实验室，四川i雅安625014；2．军事医学科学院军事兽医研究所，吉林长春130062) |
| 摘 要： | 将A/Tiger/Harbin/132/2007(H5N1)的NP基因克隆入pVAX1载体中,然后将含有NP基因的表达盒(CMV+NP+PolyA)克隆入pVAXE3的SspⅠ酶切缺失处,获得含有NP基因表达盒的穿梭载体pVAXΔE3-NP。用SalⅠ+NruⅠ分别对pVAXΔE3-NP和pPoly-2-CAV-2进行双酶切,将含有NP基因表达盒的片段定向克隆入pPoly-2-CAV-2,获得在E3区缺失处插入NP基因表达盒的重组质粒pCAV-2-NP。释放CAV-2-NP重组基因组,脂质体介导转染DK细胞,获得了能使DK细胞产生典型腺病毒样细胞病变的CAV-2-NP重组病毒。从形态学、基因组水平、NP基因的转录、NP蛋白的表达以及重组病毒的生长特征等方面进行鉴定。结果表明,CAV-2-NP具有典型的CAV-2形态特征,在繁殖过程中没有对H5N1NP表达盒片段进行缺失或重排,并且能够转录H5N1NP基因的mRNA,ELISA和免疫荧光分析表明重组表达产物可被流感病毒NP基因单克隆抗体1G6G4所识别。 |
| 关 键 词： | 虎源H5N1亚型禽流感病毒 NP基因 犬2型腺病毒 |
Construction and identification of expression NP protein of AIV H_5N_1 subtype from tiger recombinant canine adenovirus type 2 |
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| Abstract: | |
| Keywords: | AIV H5N1 subtype from tiger NP genes CAV-2 |
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