| 羊痘病毒环介导等温扩增(LAMP)检测方法的建立 |
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| 引用本文： | 黄鹤,李应国,肖进文,聂福平,王昱,刘力.羊痘病毒环介导等温扩增(LAMP)检测方法的建立[J].中国畜牧兽医,2012,39(6):72-75. |
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| 作者姓名： | 黄鹤 李应国 肖进文 聂福平 王昱 刘力 |
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| 作者单位： | 1. 西南大学动物科技学院,重庆 400715;2. 重庆市进出口食品安全工程中心,重庆 400020 |
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| 基金项目： | 质检总局科研专项，质检总局科研专项 |
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| 摘 要： | 为建立羊痘病毒(CaPV)的环介导等温扩增(LAMP)检测方法,本研究根据GenBank中羊痘病毒的保守基因序列,设计出针对羊痘病毒的LAMP引物,利用LAMP Real Time Turbidimeter LA-320仪优化得到病毒核酸等温扩增最佳条件是62 ℃恒温反应60 min。在此条件下,病毒核酸的最低检测含量为3.1×10-2 pg/μL,灵敏度比OIE推荐的PCR方法高104倍。添加钙黄绿素(calcein)建立的目测法,还可实现对上述病原体检测结果肉眼观察。本研究获得的CaPV LAMP仪器法和目测法可特异性地扩增羊痘病毒属的山羊痘病毒、绵羊痘病毒及牛疙瘩皮肤病病毒核酸,具有反应快速、特异性强、灵敏度高、操作简便、设备要求低等特点。
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| 关 键 词： | 羊痘病毒 山羊痘病毒 绵羊痘病毒 牛疙瘩皮肤病病毒 LAMP |
| 收稿时间： | 2011-12-04 |
Development of a Loop-mediated Isothermal Amplification Method for Rapid Detection of Capripoxvirus |
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| HUANG He
,
LI Ying-guo
,
XIAO Jin-wen
,
NIE Fu-ping
,
WANG Yu
,
LIU Li.Development of a Loop-mediated Isothermal Amplification Method for Rapid Detection of Capripoxvirus[J].China Animal Husbandry & Veterinary Medicine,2012,39(6):72-75. |
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| Authors: | HUANG He LI Ying-guo XIAO Jin-wen NIE Fu-ping WANG Yu LIU Li |
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| Institution: | 1. College of Animal Science and Technology,Southwest China University,Chongqing 400715,China;2. Chongqing Import and Export Food Safety Engineering Center,Chongqing 400020,China |
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| Abstract: | A method for detection of capripoxvirus(CaPV)through the loop-mediated isothermal amplification(LAMP)was established.The conditions for amplification of CaPV DNAs were optimized using LAMP Real Time Turbidimeter LA-320.It was found that at 62℃for 60min,highly efficient amplification of the goat pox virus(GPV),sheep pox virus(SPV)and bovine lump skin disease virus(LSDV)were achieved.The minimum detection of viral nucleic acid content was up to 3.1×10-2 pg/μL,104 times higher than the PCR method recommended by OIE.The method was rapid,specific and easy to operate. |
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| Keywords: | CaPV GPV SPV LSDV LAMP |
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