| 用于山羊痘病毒载体的强痘病毒启动子筛选 |
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| 引用本文： | 谢梅梅,李翠翠,张家林,王子龙,陈伟业,步志高. 用于山羊痘病毒载体的强痘病毒启动子筛选[J]. 中国预防兽医学报, 2015, 37(7) |
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| 作者姓名： | 谢梅梅 李翠翠 张家林 王子龙 陈伟业 步志高 |
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| 作者单位： | 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室,黑龙江哈尔滨,150001 |
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| 基金项目： | 国家高科技研究发展计划(863计划)，国家科技重大专项，国家科技支撑计划课题 |
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| 摘 要： | 为提高重组山羊痘病毒(GPV)中外源基因的表达水平及筛选强转录效力的启动子,本研究选择桑灯蛾昆虫痘病毒42K启动子(42K)、痘病毒合成晚期441启动子(SL441)、痘病毒合成晚期454启动子(SL454)、牛痘病毒(VV)早晚期P7.5启动子(P7.5)、VV晚期P11启动子(P11)、VV H6启动子(H6)、VV合成早晚期启动子(E/L)及人工优化早晚期启动子(LEO)8种启动子,并在其下游插入萤火虫荧光素酶(Fluc)报告基因,分别构建了启动子效力检测重组质粒。并分别将其转染于预感染GPV的DF-1(鸡)、LT(绵羊)、BHK-21(仓鼠)和Vero(猴)4种动物源细胞中,以表达海肾荧光素酶(Rluc)的p RL-TK为内参质粒,24 h后检测荧光素酶活性。结果表明,在LT细胞中,SL441转录效力最强;在DF-1细胞中,LEO转录效力最强,为其他启动子的1.19~14.46倍;在Vero细胞中,H6和SL441的转录效力较强,达到其他启动子的1.21~11.24倍;在BHK-21中,H6启动子的转录效力也显著强于其它启动子。本实验最终确定了GPV在4种动物源细胞中转录效力强的启动子,该研究结果为进一步提高以GPV为载体疫苗的免疫效力奠定了基础。
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| 关 键 词： | 启动子 山羊痘病毒 荧光素酶 转录效力 |
Screening for strong poxvirus promoter for goat poxvirus vector |
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| XIE Mei-mei,LI Cui-cui,ZHANG Jia-lin,WANG Zi-long,CHEN Wei-ye,BU Zhi-gao. Screening for strong poxvirus promoter for goat poxvirus vector[J]. Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine, 2015, 37(7) |
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| Authors: | XIE Mei-mei LI Cui-cui ZHANG Jia-lin WANG Zi-long CHEN Wei-ye BU Zhi-gao |
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