| 稳定表达山羊SLAM受体的BHK-21细胞系的建立及应用 |
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| 引用本文： | 张家林,李翠翠,谢梅梅,王子龙,陈伟业,步志高. 稳定表达山羊SLAM受体的BHK-21细胞系的建立及应用[J]. 中国预防兽医学报, 2015, 37(7) |
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| 作者姓名： | 张家林 李翠翠 谢梅梅 王子龙 陈伟业 步志高 |
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| 作者单位： | 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室,黑龙江哈尔滨,150001 |
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| 基金项目： | 国家科技重大专项，国家高科技研究发展计划(863计划)，国家科技支撑计划课题:严重威胁的外来动物疫病免疫防控储备技术 |
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| 摘 要： | 信号淋巴激活分子(SLAM)又称为CD150,是小反刍兽疫病毒(PPRV)和犬瘟热病毒(CDV)等麻疹病毒属病毒感染淋巴细胞的主要受体,在病毒侵入细胞中发挥重要作用。为建立稳定表达山羊SLAM(g SLAM)的真核细胞系,本研究将人工合成的g SLAM基因克隆至真核表达质粒p IRESpuro3中,并在该基因的3'端引入Flag标签序列作为分子标记,构建了重组质粒p IRES3-g SLAM。将该重组质粒转染BHK-21细胞,经嘌呤霉素加压筛选及采用表达绿色荧光蛋白(GFP)的重组PPRV病毒(r PPRV/GFP)感染鉴定后,筛选到稳定表达g SLAM基因的细胞系。r PPRV/GFP感染和western blot鉴定表明,无论是否有嘌呤霉素压力的存在,该细胞系在传代至第20代,仍能稳定表达g SLAM蛋白。由于g SLAM氨基酸序列与犬的同源性较高,以表达GFP重组CDV强毒株(r CDV/GFP)感染该细胞系,病毒可以感染且能形成明显的细胞病变,表明该细胞系可用于CDV强毒分离和致弱机制等相关研究。
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| 关 键 词： | 信号淋巴细胞激活分子 BHK-21细胞 小反刍兽疫 犬瘟热 病毒分离 |
The establishment and application of BHK-21 expressing goat SLAM |
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| ZHANG Jia-lin,LI Cui-cui,XIE Mei-mei,WANG Zi-long,CHEN Wei-ye,BU Zhi-gao. The establishment and application of BHK-21 expressing goat SLAM[J]. Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine, 2015, 37(7) |
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| Authors: | ZHANG Jia-lin LI Cui-cui XIE Mei-mei WANG Zi-long CHEN Wei-ye BU Zhi-gao |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | signalling lymphocyte activation molecule (SLAM) BHK-21 peste des petits ruminants canine distemper virus isolation |
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