| 帕利亚姆血清群病毒一步法RT-PCR检测技术的建立 |
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| 引用本文： | 李占鸿,廖德芳,杨振兴,张洁,肖雷,李华春,杨恒.帕利亚姆血清群病毒一步法RT-PCR检测技术的建立[J].中国预防兽医学报,2020(1):40-45. |
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| 作者姓名： | 李占鸿 廖德芳 杨振兴 张洁 肖雷 李华春 杨恒 |
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| 作者单位： | 云南省畜牧兽医科学院热带亚热带动物病毒重点实验室;云南农业大学动物医学院 |
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| 基金项目： | 云南省科技厅科技计划项目-青年项目(2018FD002);国家重点研发计划(2016YFD0500908);国家重点研发计划(2017YFC1200505);公益性行业(农业)科研专项(201303035)。 |
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| 摘 要： | 帕利亚姆血清群病毒(PALV)在我国广泛流行,给我国牛羊养殖业健康发展构成了严重威胁,目前国内尚无PALV核酸检测方法的报道。本研究根据流行于我国的中山病毒(CHUV)、Bunyip Creek virus(BCV)和D’Aguilar virus(DAV)3种血清型PALV的Seg-7保守基因序列,设计针对PALV的群特异性RT-PCR扩增引物,通过反应条件优化,建立了PALV的一步法RT-PCR检测方法,其最佳引物浓度为0.8μmol/L;最佳退火温度为56℃。对该方法进行特异性试验,结果显示该方法可特异性的检测出CHUV、BCV和DAV核酸,而对环状病毒属的蓝舌病病毒、流行性出血病病毒、非洲马瘟病毒和广西环状病毒的检测结果均为阴性;敏感性试验结果显示,该方法对RNA标准品的最低检测限为6.9×10~1拷贝/μL。利用该方法检测血液样品,结果显示该方法检测结果与病毒分离结果基本一致。本研究建立的PALV一步法RT-PCR方法具有特异性强、敏感度高等优点,为开展PALV感染疫病诊断与流行病学研究提供了技术保障。
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| 关 键 词： | 帕利亚姆血清群病毒 一步法RT-PCR 检测技术 建立 |
The development of a one-step RT-PCR assay for the detection of PALV |
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| LI Zhan-hong,LIAO De-fang,YANG Zhen-xing,ZHANG Jie,XIAO Lei,LI Hua-chun,YANG Heng.The development of a one-step RT-PCR assay for the detection of PALV[J].Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine,2020(1):40-45. |
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| Authors: | LI Zhan-hong LIAO De-fang YANG Zhen-xing ZHANG Jie XIAO Lei LI Hua-chun YANG Heng |
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| Institution: | (Yunnan Tropical and Subtropical Animal Virus Diseases Laboratory,Yunnan Animal Science and Veterinary Institute,Kunming 650224,China;College of Veterinary Medicine,Yunnan Agricultural University,Kunming 650224,China) |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | palyam serogroup virus one-step RT-PCR detection |
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