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苏云金芽孢杆菌4.0718菌株晶体毒素性质的研究
引用本文:丁学知,邹先琼,孙运军,付祖姣,高必达,夏立秋. 苏云金芽孢杆菌4.0718菌株晶体毒素性质的研究[J]. 农业生物技术学报, 2005, 13(3): 365-371
作者姓名:丁学知  邹先琼  孙运军  付祖姣  高必达  夏立秋
作者单位:1. 湖南农业大学植物保护学院,长沙,410128;湖南师范大学生命科学学院,长沙,410081
2. 湖南师范大学生命科学学院,长沙,410081
3. 湖南农业大学植物保护学院,长沙,410128
基金项目:国家自然科学基金项目(No.30270037,30470043);国家高技术研究与发展计划(863)项目(No.2002AA245021)和湖南省自然科学基金项目(No.03JJY3025)资助.
摘    要:以苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis,Bt)4.0718菌株伴孢晶体65kD原毒素为材料,比较了几种染色-脱色方法对电洗脱回收蛋白的影响。蛋白纯化的步骤包括SDS-PAGE分离、采用自制蛋白回收装置电洗脱回收杀虫晶体蛋白及抗胰蛋白酶核心多肽、超滤法脱盐、冷丙酮沉淀法除去考马斯亮蓝及SDS。经SDS—PAGE检测,呈现出均一的蛋白带,回收蛋白达到了电泳纯。以双向凝胶电泳(2-DE)技术分析了苏云金芽孢杆菌库斯塔克亚种HD—1和4.0718菌株伴孢晶体内的蛋白质组分。结果表明,两者相互匹配的蛋白点有54个,HD—1菌株的130kD亚基有2个点,其等电点在5.25~5.75之间,65kD亚基在等电点3.4~8.3之间具有广泛的分布,130与65kD之间的亚基的等电点集中在3.5~4.2之间,65kD以下亚基的等电点集中在3.5~6.2之间;4.0718菌株的130kD亚基仅有1个点,65kD亚基的蛋白点比HD-1菌株更多,130与65kD之间的亚基、65kD以下的亚基蛋白点均比HD-1菌株多且等电点分布范围更广。

关 键 词:苏云金芽孢杆菌 杀虫晶体蛋白 SDS-PAGE 电洗脱 双向电泳 4.0718菌株 伴孢晶体 毒素性质 双向凝胶电泳 蛋白纯化
收稿时间:2004-05-09
修稿时间:2004-09-02

Characterization of the Insecticidal Crystal Protoxins from Bacillus thuringiensis Strain 4.0718
DING Xue-zhi,ZOU Xian-Qiong,SUN Yun-Jun,FU Zu-Jiao,GAO Bi-Da,XIA Li-Qiu. Characterization of the Insecticidal Crystal Protoxins from Bacillus thuringiensis Strain 4.0718[J]. Journal of Agricultural Biotechnology, 2005, 13(3): 365-371
Authors:DING Xue-zhi  ZOU Xian-Qiong  SUN Yun-Jun  FU Zu-Jiao  GAO Bi-Da  XIA Li-Qiu
Abstract:
Keywords:Bacillus thuringiensis   insecticidal crystal proteins   SDS-PAGE   electroelution   two-dimensional gel electrophoresis
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