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口蹄疫O型、A型和AsiaⅠ型病毒RT-PCR分型方法的建立
引用本文:上官陶,王洪梅,宋玲玲,武建明,于力,何洪彬.口蹄疫O型、A型和AsiaⅠ型病毒RT-PCR分型方法的建立[J].现代农业科技,2013(14):249-250,254.
作者姓名:上官陶  王洪梅  宋玲玲  武建明  于力  何洪彬
作者单位:山东省农业科学院奶牛研究中心;中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
基金项目:泰山学者海外特聘专家(tshw20100417);现代农业(奶牛)产业技术体系岗位科学家(Cars-37);国家自然科学基金项目(31272686);济南市高效院所自主创新计划(201004027);济南市高效院所自主创新计划(201202059);山东省自然科学基金(ZR2010CQ029)
摘    要:该研究旨在建立一种快速、灵敏及准确的口蹄疫病毒(FMDV)鉴定与分型的RT-PCR检测技术平台,为临床中有效准确地检测口蹄疫病毒提供有力的支持。根据NCBI中公布的FMDV序列(GenBank:JF749861.1),设计FMDV通用检测引物FP1/FP2;根据NCBI中公布的FMDV O型、A型和Asia Ⅰ型序列,经过序列分析比对后,分别设计FMDV分型引物FO1/FO2、FA1/FA2和FAS1/FAS2。提取FMDVRNA后,利用随机引物扩增得到FMDV全cDNA,利用设计的引物进行PCR扩增及PCR反应条件的优化。结果表明:该研究建立的RT-PCR检测方法具有很好的特异性、敏感性和可重复性。成功建立了FMDV O型、A型和Asia Ⅰ型检测及分型方法,为口蹄疫疾病的临床检测、流行病学相关调查及针对性的疫苗的制备奠定基础

关 键 词:口蹄疫  RT-PCR  O型  A型  AsiaⅠ型
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