| 诺氟沙星单克隆抗体的制备及其特性鉴定 |
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| 引用本文： | 刘庆堂,职爱民,李青梅,柴书军,赵东,张磊,邓瑞广,张改平. 诺氟沙星单克隆抗体的制备及其特性鉴定[J]. 中国预防兽医学报, 2010, 11(9). DOI: 10.3969/j.issn.1008-0589.2010.09.14 |
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| 作者姓名： | 刘庆堂 职爱民 李青梅 柴书军 赵东 张磊 邓瑞广 张改平 |
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| 作者单位： | 河南省农业科学院,农业部动物免疫学重点开放实验室,河南郑州,450002 |
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| 基金项目： | 十一五国家科技支撑计划 |
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| 摘 要： | 为制备诺氟沙星单克隆抗体(MAb),用碳二亚胺法将诺氟沙星(Norfloxacin,NFLX)分别偶联于载体蛋白牛血清白蛋白(BSA)和卵清蛋白(OVA),合成免疫原BSA-NFLX和包被原OVA-NFLX,并用紫外(UV)扫描、SDS-PAGE电泳和免疫小鼠进行鉴定;用BSA-NFLX免疫BALB/C小鼠,间接ELISA和阻断ELISA选择细胞融合备用鼠;应用杂交瘤技术建立分泌NFLX MAb的细胞株,用体内诱生腹水法制备NFLX MAb;对NFLX MAb的效价、敏感性和特异性等特性进行测定。结果表明:NFLX人工抗原制备成功,融合筛选后获得3C6、3G11两株特异敏感的杂交瘤细胞,两株细胞培养上清液效价为1∶512,腹水效价为1∶6.4×105,3C6株对NFLX的IC50为2.52μg/L,与二氟沙星、沙拉沙星有小于0.03%的交叉反应性,与其他抑制物无交叉反应性。本实验获得了高效价、敏感、特异的抗NFLXMAb,为NFLX残留快速检测方法的建立奠定了基础。
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| 关 键 词： | 诺氟沙星 单克隆抗体 免疫学特性 |
Development of monoclonal antibody against Norfloxacin |
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| LIU Qing-tang,ZHI Ai-min,LI Qing-mei,CHAI Shu-jun,ZHAO Dong,ZHANG Lei,DENG Rui-guang,ZHANG Gai-ping. Development of monoclonal antibody against Norfloxacin[J]. Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine, 2010, 11(9). DOI: 10.3969/j.issn.1008-0589.2010.09.14 |
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| Authors: | LIU Qing-tang ZHI Ai-min LI Qing-mei CHAI Shu-jun ZHAO Dong ZHANG Lei DENG Rui-guang ZHANG Gai-ping |
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