用抗体致敏SPA菌体浓缩新城疫病毒方法的建立

将金黄色葡萄球菌与灭活的猪抗新城疫病毒(NDV)抗血清混合，37C感作致敏30min，将致敏的金黄色葡萄球菌加入NDV污染材料洗脱液中，37C水浴30min，离心洗涤并悬浮菌体于PBS中，取适量用于电镜观察或RTPCR。结果显示，电镜下观察可见NDV吸附到金黄色葡萄球菌表面；经RT—PCR对吸附NDV的菌体进行扩增后可见到特异性扩增带。通过条件优化，建立了NDV浓缩方法。用HA效价为2^9的NDV F48E9毒株尿囊液1：800、1：1600和1：3200稀释液分别喷洒树叶及谷物，采用上述方法浓缩病毒，并经RT—PCR检测。结果表明，致敏的金黄色葡萄球菌能够浓缩病毒，提高RT—PCR检测的敏感性。