猪传染性胃肠炎病毒核衣壳蛋白(N)在昆虫细胞中的表达及病毒样颗粒的观察 |
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引用本文: | 宋振辉,卿家超,程方俊,沙 莎,周廷宣.猪传染性胃肠炎病毒核衣壳蛋白(N)在昆虫细胞中的表达及病毒样颗粒的观察[J].西南农业大学学报,2014,36(5):007-012. |
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作者姓名: | 宋振辉 卿家超 程方俊 沙 莎 周廷宣 |
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作者单位: | 1. 西南大学(荣昌校区)动物医学系,重庆荣昌402460;2. 新疆农业大学动物医学学院,乌鲁木齐830052 |
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基金项目: | 新疆维吾尔族自治区教育厅科研计划项目资助(20120984);中央高校基本科研业务基金重点项目资助(XDJK2014B039) |
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摘 要: | 利用RT-PCR方法扩增猪传染性胃肠炎病毒(TGEV )核衣壳蛋白N 基因,将其克隆入杆状病毒供体质粒
pFastBacTM Dual,pFastBacTM Dual-N转入DH10Bac菌中进行同源重组,经三重抗性和蓝白斑筛选,得到重组质粒
Bacmid-N,将其转染昆虫细胞sf9,获得重组杆状病毒rBac-N.通过间接免疫荧光试验检测显示,重组蛋白在昆
虫细胞中得到表达.体外组装TGEV病毒样颗粒(VLPs)试验表明,rBac-N 单独感染sf9细胞未见形成明显的病
毒样颗粒,昆虫细胞内只观察到杆状病毒粒子.试验结果为探讨TGEV 核衣壳蛋白在病毒装配过程中的作用提
供了依据.
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关 键 词: | 猪传染性胃肠炎病毒(TGEV) N基因 sf9细胞 病毒样颗粒 |
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