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常规和巢式PCR对柑橘黄龙病菌的检测灵敏度比较
引用本文:鹿连明,胡秀荣,张利平,黄振东,陈国庆.常规和巢式PCR对柑橘黄龙病菌的检测灵敏度比较[J].热带作物学报,2010,31(8):1280-1287.
作者姓名:鹿连明  胡秀荣  张利平  黄振东  陈国庆
作者单位:浙江省柑橘研究所,浙江台州,318020
基金项目:国家现代柑橘产业技术体系华东柑橘综合试验站专项经费,浙江省农科院科技创新能力提升工程项目,台州市科技计划项目 
摘    要:根据柑橘黄龙病(citrus Huanglongbing,HLB)病菌16SrDNA、16S/23S核糖体基因间隔区(ribosomal intergenic region,RIR)、核糖体蛋白β操纵子(β-operon)和外膜蛋白(out membrane protein,OMP)基因序列设计了8对引物,通过常规和巢式PCR方法对各引物的检测灵敏度进行了比较。结果表明,不同引物的检测灵敏度不同。对于上述任何基因,巢式PCR的灵敏度均比常规PCR至少高103倍;对于同一种基因,扩增短片段的引物比扩增长片段的引物灵敏度高或相当;在扩增产物大小相同时,用以扩增核糖体蛋白β操纵子基因的引物较其他三种稍高。对不同症状柑橘样品的检测进一步验证了该结果。因此,对于柑橘黄龙病的检测,可优先考虑使用巢式PCR方法,若使用常规PCR,则宜选用具有高灵敏度的扩增小片段引物。

关 键 词:柑橘黄龙病  常规PCR  巢式PCR  灵敏度

A Comparison of Detection Sensitivity of Conventional PCR and Nested PCR for Citrus Huanglongbing Pathogen
Lu Lianming,Hu Xiurong,Zhang Liping,Huang Zhendong and Chen Guoqing.A Comparison of Detection Sensitivity of Conventional PCR and Nested PCR for Citrus Huanglongbing Pathogen[J].Chinese Journal of Tropical Crops,2010,31(8):1280-1287.
Authors:Lu Lianming  Hu Xiurong  Zhang Liping  Huang Zhendong and Chen Guoqing
Institution:Zhejiang Citrus Research Institute;Zhejiang Citrus Research Institute;Zhejiang Citrus Research Institute;Zhejiang Citrus Research Institute;Zhejiang Citrus Research Institute
Abstract:
Keywords:Citrus Huanglongbing  Conventional PCR  Nested PCR  Sensitivity
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