栽培一粒小麦α-，γ-，ω-醇溶蛋白基因的克隆与序列分析

为全面揭示栽培一粒小麦诱发乳糜泻（Celiac disease，CD) 的毒性和在小麦品质改良中的应用价值，根据已注册基因的保守序列分别设计2~3对特异引物，采用AS-PCR技术对栽培一粒小麦的醇溶蛋白新基因进行克隆、CD毒性肽识别和同源性分析。结果表明，从栽培一粒小麦中分别克隆得到26个具有独特编码区的α-（命名为：Gli-A-1~Gli-A-7，GenBank登陆号为JN831382-JN831385和JX828193~JX828195）、γ-（命名为：Gli-R-1~Gli-R-6，GenBank登陆号为HM120220，JX828376~JX828380）、ω-（命名为：Gli-w-1~ Gli-w-13）醇溶蛋白新基因和1个已知基因（Gli-R-7，ACJ03494）。CD毒性肽的识别分析表明，栽培一粒小麦具有较强的CD毒性，分布于醇溶蛋白的5种主要T细胞优势多肽和4种“毒性肽”除A基因组来源的α-醇溶蛋白中不含有的毒性肽Glia-α2和Glia-α外，其余多肽在克隆基因的编码蛋白中均有分布。克隆基因与已知基因的同源性分析表明，α-、γ-醇溶蛋白的推断氨基酸序列存在明显的基因组来源的差异性，而ω-醇溶蛋白基因的基因组来源差异不明显。此外，所克隆的7个α-醇溶蛋白变异相对广泛，而γ-、ω-醇溶蛋白基因的组成则相对单一，具有极高的相似度。