| 多粘类芽胞杆菌菌株M-1启动子片段的克隆及绿色荧光蛋白的表达 |
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| 引用本文： | 赵婧婧,王爽,王琦,梅汝鸿.多粘类芽胞杆菌菌株M-1启动子片段的克隆及绿色荧光蛋白的表达[J].农业生物技术学报,2010,18(4):788-792. |
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| 作者姓名： | 赵婧婧 王爽 王琦 梅汝鸿 |
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| 作者单位： | 中国农业大学植物病理学系,农业部植物病理学重点开放实验室,北京,100193 |
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| 摘 要： | 应用启动子探针载体pECE7,从多粘类芽胞杆菌（Panebacillus polymyxa）菌株M-1基因组克隆到一系列启动子活性片段,通过氯霉素（chloramphenicol chloromycetin,Cm）浓度梯度筛选出Cm抗性较强的3个片段。将这3个具有启动子活性的片段与来自GFP表达载体pGFP78的gfpmut3a基因插入Escherichiacoli-Bacillus穿梭载体pHY300PLY中,获得GFP表达载体pGFP5,pGFP8和pGFP17。通过热激转化E.coliDH5α,荧光显微镜下观察到明亮的绿色荧光,表明筛选到的启动子片段具有良好的启动外源基因gfp转录的功能。同时利用此表达载体标记本实验筛选得到的生防蜡样芽胞杆菌（Bacilluscereus）菌株B905,获得了GFP标记的工程菌Bacillus cereus B905（gfp-5、gfp-8和gfp-17）,通过荧光显微镜观察,发现转入GFP表达载体pGFP5和pGFP8后,菌体有明亮的绿色荧光,而转入pGFP17的菌体荧光相对较弱。
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| 关 键 词： | 多粘类芽胞杆菌 蜡样芽胞杆菌 启动子 gfp标记 |
Cloning of Promoter Fragment from Panebacillus polymyxa M-1 and Expression of Its Green Fluorescent Protein |
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| Zhao Jingjing,Wang Shuang,Wang Qi,Mei Ruhong.Cloning of Promoter Fragment from Panebacillus polymyxa M-1 and Expression of Its Green Fluorescent Protein[J].Journal of Agricultural Biotechnology,2010,18(4):788-792. |
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| Authors: | Zhao Jingjing Wang Shuang Wang Qi Mei Ruhong |
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