| 海洋细菌来源低温褐藻胶裂解酶的分泌表达和酶学性质研究 |
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| 引用本文： | 张文彬,白露,刘彬,王朋梅,莫照兰,李杰. 海洋细菌来源低温褐藻胶裂解酶的分泌表达和酶学性质研究[J]. 渔业科学进展, 2021, 42(6): 117-124 |
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| 作者姓名： | 张文彬 白露 刘彬 王朋梅 莫照兰 李杰 |
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| 作者单位： | 上海海洋大学 水产科学国家级实验教学示范中心 国家水生动物病原库 上海 201306;中国水产科学研究院黄海水产研究所 农业农村部海水养殖病害防治重点实验室 青岛海洋科学与技术试点国家实验室海洋渔业科学与食物产出过程功能实验室 山东 青岛 266071;青岛市精神卫生中心 山东 青岛 266034;中国水产科学研究院黄海水产研究所 农业农村部海水养殖病害防治重点实验室 青岛海洋科学与技术试点国家实验室海洋渔业科学与食物产出过程功能实验室 山东 青岛 266071;中国海洋大学海洋生命学院 山东 青岛 266003 |
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| 基金项目： | 国家藻类产业技术体系资助 |
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| 摘 要： | 为了筛选稳定性较好的低温褐藻胶裂解酶，本研究进行了海洋细菌分离鉴定、酶的编码基因克隆与分析、酶分泌表达与纯化、不同因素对酶活力和稳定性的影响以及酶解产物分析实验。结果显示，用以褐藻胶为唯一碳源的平板，筛选出一株能分泌低温褐藻胶裂解酶的海洋细菌SJ-H-12，基于16S rDNA序列构建进化树，该菌株鉴定为Yangia sp. SJ-H-12。进而克隆酶的编码基因Alyya，ALYYA属于PL5家族褐藻胶裂解酶。将基因在食品级宿主解脂耶氏酵母(Yarrowia lipolytica)中进行分泌表达，重组ALYYA的活力达到34.2 U/mL，分子量约为39.0 kDa，具有较强的PolyM偏好性。ALYYA在25℃~35℃时表现出80%以上的活力，且在30℃时表现出最高活力；在pH为5.0~10.0的范围内稳定性较好，孵育后剩余超过60%的活力；0~2.0 mol/L的NaCl能明显激活ALYYA的活力。ALYYA降解褐藻胶的产物主要是二糖，另有少部分单糖和三糖，该酶是一种内切褐藻胶裂解酶。综上所述，本研究筛选到一株产低温褐藻胶裂解酶细菌，所产ALYYA是典型的低温褐藻胶裂解酶，具有优良的酶活力和稳定性。本研究为低温褐藻胶裂解酶的筛选和开发利用提供了参考数据。
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| 关 键 词： | 褐藻胶裂解酶 分泌表达 编码基因 pH稳定性 |
| 收稿时间： | 2020-04-27 |
| 修稿时间： | 2020-07-06 |
Secretory expression and enzymatic properties of low-temperature-adapted alginate lyase from marine bacteria |
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| ZHANG Wenbin,BAI Lu,LIU Bin,WANG Pengmei,MO Zhaolan,LI Jie. Secretory expression and enzymatic properties of low-temperature-adapted alginate lyase from marine bacteria[J]. Progress in Fishery Sciences, 2021, 42(6): 117-124 |
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| Authors: | ZHANG Wenbin BAI Lu LIU Bin WANG Pengmei MO Zhaolan LI Jie |
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| Affiliation: | Shanghai Ocean University, National Demonstration Center for Experimental Fisheries Science Education, National Pathogen Collection Center for Aquatic Animals, Shanghai 201306, China; Yellow Sea Fisheries Research Institute, Chinese Academy of Fishery Sciences, Laboratory for Marine Fisheries Science and Food Production Processes, Pilot National Laboratory for Marine Science and Technology (Qingdao), Key Laboratory of Maricultural Organism Disease Control, Ministry of Agriculture and Rural Affairs, Qingdao, Shandong 266071, China;Qingdao Mental Health Center, Qingdao, Shandong 266034, China;College of Marine Life Sciences, Ocean University of China, Qingdao, Shandong 266003, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Alginate lyase Secretory expression Coding gene pH stability |
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