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| rpoS对鳗弧菌MHK3株Hcp表达和杀菌能力的影响 | |
| 作者姓名： | 王小鹿 李杰 李贵阳 唐磊 杨慧超 莫照兰 |
| 作者单位： | 中国海洋大学海洋生命学院 山东 青岛 266003;中国水产科学研究院黄海水产研究所 农业农村部海水养殖病害防治重点实验室 青岛海洋科学与技术试点国家实验室海洋渔业科学与食物产出过程功能实验室 山东 青岛 266071;中国水产科学研究院黄海水产研究所 农业农村部海水养殖病害防治重点实验室 青岛海洋科学与技术试点国家实验室海洋渔业科学与食物产出过程功能实验室 山东 青岛 266071;中国海洋大学海洋生命学院 山东 青岛 266003;中国海洋大学三亚海洋研究院 海南 三亚 572000;中国水产科学研究院黄海水产研究所 农业农村部海水养殖病害防治重点实验室 青岛海洋科学与技术试点国家实验室海洋渔业科学与食物产出过程功能实验室 山东 青岛 266071;上海海洋大学水产科学国家级实验教学示范中心 上海 201306;中国海洋大学海洋生命学院 山东 青岛 266003;中国水产科学研究院黄海水产研究所 农业农村部海水养殖病害防治重点实验室 青岛海洋科学与技术试点国家实验室海洋渔业科学与食物产出过程功能实验室 山东 青岛 266071;中国海洋大学三亚海洋研究院 海南 三亚 572000 |
| 基金项目： | 国家重点研发计划;中国水产科学研究院基本科研业务费专项;海南重要水产养殖动物全基因组育种技术研发共同资助 |
| 摘 要： | 溶血素共调节蛋白(Hcp)的合成和分泌是六型分泌系统(T6SS)行使功能的重要特征。RNA聚合酶的σ亚基RpoS参与调节细菌的生长和应激反应。为了探究RpoS对鳗弧菌(Vibrio anguillarum) T6SS的调控作用，本研究构建了MHK3?rpoS突变株，检测了部分表型特征的变化；利用lacZ半乳糖苷酶报告基因检测了突变株hcp1和hcp2在转录水平的变化；进行Western blot并定量分析突变株Hcp在翻译水平的变化；并通过细菌拮抗实验检测了突变株杀菌能力的变化。结果显示，MHK3?rpoS突变株的生长情况、泳动性、明胶酶活性及酪蛋白酶活性与MHK3野生株相比无显著差异(P>0.05)，而平台早期的菌膜形成能力有显著上升(P<0.05)；在各生长时期，MHK3?rpoS的hcp1和hcp2在转录水平的表达量均较MHK3有显著上升(P<0.01)，最高时分别为MHK3的1.79倍和1.94倍；在翻译水平上，MHK3?rpoS在胞内和胞外Hcp的分泌均有显著升高(P<0.05)，最高时分别为MHK3的1.59倍和1.31倍；同时，MHK3?rpoS对大肠杆菌(Escherichia coli) E5的杀菌能力约为MHK3的1%。研究表明，rpoS对鳗弧菌MHK3株的生长情况、泳动性、明胶酶活性及酪蛋白酶活性均无显著调控作用，但对平台早期的菌膜形成能力具有一定的负调控作用，在转录和翻译水平上也负调控Hcp的表达。而在杀菌能力上，rpoS发挥一定的正调控作用。说明菌株的杀菌能力强弱并非直接与Hcp的表达和分泌量正相关。本研究为进一步阐明T6SS的调控机制及其介导的杀菌作用机制提供了新思路，并丰富了其理论基础。 |
| 关 键 词： | 鳗弧菌 rpoS Hcp T6SS 杀菌 |
| 收稿时间： | 2020/5/4 0:00:00 |
| 修稿时间： | 2020/7/5 0:00:00 |
The effect of rpoS on Hcp expression and bactericidal activity in Vibrio anguillarum MHK3 |
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| Authors: | WANG Xiaolu LI Jie LI Guiyang TANG Lei YANG Huichao MO Zhaolan |
| Institution: | College of Marine Life Sciences, Ocean University of China, Qingdao, Shandong 266003, China; Yellow Sea Fisheries Research Institute, Chinese Academy of Fishery Sciences; Key Laboratory of Maricultural Organism Disease Control, Ministry of Agriculture and Rural Affairs; Laboratory for Marine Fisheries Science and Food Production Processes, Pilot National Laboratory for Marine Science and Technology (Qingdao), Qingdao, Shandong 266071, China;College of Marine Life Sciences, Ocean University of China, Qingdao, Shandong 266003, China; Sanya Ocean Institute, Ocean University of China, Sanya, Hainan 572000, China;Yellow Sea Fisheries Research Institute, Chinese Academy of Fishery Sciences; Key Laboratory of Maricultural Organism Disease Control, Ministry of Agriculture and Rural Affairs; Laboratory for Marine Fisheries Science and Food Production Processes, Pilot National Laboratory for Marine Science and Technology (Qingdao), Qingdao, Shandong 266071, China; National Demonstration Center for Experimental Fisheries Science Education, Shanghai Ocean University, Shanghai 201306, China; College of Marine Life Sciences, Ocean University of China, Qingdao, Shandong 266003, China; Yellow Sea Fisheries Research Institute, Chinese Academy of Fishery Sciences; Key Laboratory of Maricultural Organism Disease Control, Ministry of Agriculture and Rural Affairs; Laboratory for Marine Fisheries Science and Food Production Processes, Pilot National Laboratory for Marine Science and Technology (Qingdao), Qingdao, Shandong 266071, China; Sanya Ocean Institute, Ocean University of China, Sanya, Hainan 572000, China |
| Abstract: | |
| Keywords: | Vibrio anguillarum rpoS Hcp T6SS Bactericidal activity |
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