口蹄疫病毒多基因片段的克隆及其杆状病毒表达载体的构建 |
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引用本文: | 冷青文,郭慧琛,云涛,刘在新,谢庆阁,张居农.口蹄疫病毒多基因片段的克隆及其杆状病毒表达载体的构建[J].中国兽医科技,2004,34(6):16-20. |
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作者姓名: | 冷青文 郭慧琛 云涛 刘在新 谢庆阁 张居农 |
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作者单位: | [1]中国农业科学院兰州兽医研究所,甘肃兰州730046 [2]石河子大学动物科技学院,新疆石河子832003 |
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摘 要: | 根据定点突变原理获得了包含口蹄疫病毒P1、2A、3C、3D及部分2B编码区的目的基因片段,经SpeⅠ和HindⅢ双酶切后,与经相同方法处理的杆状病毒转移载体pFastBacHT连接,得到了重组质粒pFB-P12X3C3D。经酶切和测序鉴定后,将其转化入含穿梭载体Bacmid的感受态细胞DH10Bac,经抗性及蓝白斑筛选,得到了含P12X3C3D多基因的重组穿梭载体,将其命名为Bacmid-P12X3C3D;提取其DNA并转染Sf9昆虫细胞,最后获得含口蹄疫病毒P12X3C3D多基因的重组杆状病毒。
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关 键 词: | 口蹄疫病毒 P12X3C3D多基因 杆状病毒表达系统 载体构建 |
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