烟草瞬时表达人表皮细胞生长因子(hEGF) |
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引用本文: | 薛 萍,柳月英,付宏岐,于 欣,董健伟,刘秀明,官丽莉.烟草瞬时表达人表皮细胞生长因子(hEGF)[J].陕西农业科学,2016(2):20-24. |
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作者姓名: | 薛 萍 柳月英 付宏岐 于 欣 董健伟 刘秀明 官丽莉 |
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作者单位: | (1. 渭南职业技术学院 食品检测中心,陕西 渭南 714000;2. 吉林农业大学 生物反应器与药物开发教育部工程研究中心,吉林 长春 130118;3. 东北师范大学 附属中学,吉林 长春 130028) |
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基金项目: | 国家高技术研究发展计划(863)资助项目(2011AA100606);渭南市科技创新扶持项目(2013KYJ-4);渭南职业技术学院院级重点课题(WZYZ201306)。 |
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摘 要: | 构建人表皮细胞生长因子(hEGF)病毒表达载体,为实现h EGF在烟草中瞬时表达提供理论和实验依据。PCR扩增获得hEGF基因,将其连接到马铃薯病毒表达载体pGR107上,利用农杆菌介导法感染烟草叶片,对其进行转录水平和翻译水平检测。根据GFP的表达确定收获hEGF时间为病毒侵染叶片后第7天;RT-PCR检测的结果表明hEGF基因在转录水平有表达;Western blotting、ELISA和MTT结果表明感染烟草叶片中有hEGF蛋白表达,表达量为总可溶蛋白的0.0103%,且具有生物活性。
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关 键 词: | 烟草 瞬时表达 人表皮生长因子(hEGF) |
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