| 液相芯片技术同时检测六种猪繁殖障碍病毒的方法研究 |
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| 引用本文： | 杨显超,吴秀娟,李凯航,杨德全,鞠厚斌,葛菲菲,王建. 液相芯片技术同时检测六种猪繁殖障碍病毒的方法研究[J]. 中国动物检疫, 2016, 33(12): 78-84 |
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| 作者姓名： | 杨显超 吴秀娟 李凯航 杨德全 鞠厚斌 葛菲菲 王建 |
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| 基金项目： | 上海市市级农口系统青年人才成长计划（沪农青字〔2014〕第2-11号）；上海市生猪产业技术体系（沪农科产字〔2016〕第6号） |
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| 摘 要： | 在GenBank中收集猪细小病毒(PPV)结构蛋白VP2基因、猪圆环病毒2型(PCV2)的ORF2序列、猪伪狂犬病毒(PRV)的gB基因、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的NSP2基因、猪瘟病毒(CSFV)的E2基因和乙型脑炎病毒(JEV)的M基因,利用Primer5.0等分子生物学软件对收集的序列分析比较,筛选出上述基因的特异保守序列并设计引物和探针,将设计好的探针与相应的微球偶联,优化条件,建立检测方法。结果表明:建立的检测PPV、PCV2、PRV、PRRSV、CSFV、JEV6种病毒核酸的多重液相芯片技术具有较好的特异性、敏感性和稳定性,对PPV、PCV2、PRV、PRRSV、CSFV、JEV6种病毒核酸的最低检出量分别为8.50×10~2copies/μL、2.87×10~2copies/μL、2.07×10~2copies/μL、2.61×10~2copies/μL、2.34×10~2copies/μL、2.05×10~2copies/μL,与相应病毒PCR/RT-PCR检测方法相比,敏感性提高了100~1000倍;对临床388份样品同步进行荧光PCR与液相芯片检测,结果99.87%相符。本方法为液相芯片技术在动物多病毒快速高通量检测、鉴别诊断等应用方面奠定了基础。
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| 关 键 词： | 液相芯片技术；猪繁殖障碍病毒；检测方法 |
Establishment of a Multiplex Supension Array for Simultaneous Detection of Six Kinds of Porcine Reproductive Failure Virus |
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| Yang Xianchao,Wu Xiujuan,Li Kaihang,Yang Dequan,Ju Houbin,Ge Feifei,Wang Jian. Establishment of a Multiplex Supension Array for Simultaneous Detection of Six Kinds of Porcine Reproductive Failure Virus[J]. China Animal Health Inspection, 2016, 33(12): 78-84 |
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| Authors: | Yang Xianchao Wu Xiujuan Li Kaihang Yang Dequan Ju Houbin Ge Feifei Wang Jian |
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