超高效液相色谱-串联质谱法同时测定人尿中5种甾体激素

为建立人尿中5种临床常用甾体激素(雌三醇、氢化可的松、17β-雌二醇、睾酮和孕酮)的超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)测定方法,尿样经β-葡萄糖醛酸酶水解(55℃水浴3h)和C18固相萃取柱净化后,采用Waters ACQUITY UPLC HSS T3(2.1mm×100mm,1.8μm)色谱柱分离,流动相为0.1%甲酸-乙腈和0.1%甲酸-水溶液,流速0.3mL·min-1,梯度洗脱,电喷雾正离子模式电离,多反应监测模式检测,睾酮-d3内标法定量。结果表明:在优化条件下,5种甾体激素在相应浓度范围内的决定系数为0.996 4~0.999 4,检出限为0.1~1.0ng·mL~(-1),定量限为0.3~3.0ng·mL~(-1),平均回收率为85.3%~105.6%,日内和日间的相对标准偏差均小于15%。该方法快速、灵敏、准确,可满足人尿中5种甾体激素同时检测的要求。