| eIF5A基因敲除MARC-145多克隆细胞系的建立及其对PRRSV增殖的影响 |
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| 引用本文： | 李华玮,王旭英,井汇源,万博,乔宏兴,郭科威,侯文静. eIF5A基因敲除MARC-145多克隆细胞系的建立及其对PRRSV增殖的影响[J]. 中国农业大学学报, 2023, 28(7): 122-129 |
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| 作者姓名： | 李华玮 王旭英 井汇源 万博 乔宏兴 郭科威 侯文静 |
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| 作者单位： | 河南牧业经济学院 食品与生物工程学院, 郑州 450046; 河南牧业经济学院 畜产品质量安全技术研究院, 郑州 450046;河南牧业经济学院 动物医药学院, 郑州 450046;河南农业大学 动物医学院, 郑州 450046 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目(31902284);河南省科技研发计划联合基金(应用攻关类)(222103810022);河南省科技攻关计划项目(232102110104);河南省高等学校青年骨干教师培养计划项目(2020GGJS258);河南牧业经济学院预防兽医重点学科(XJXK202202) |
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| 摘 要： | 旨在利用CRISPR/Cas9系统构建敲除真核翻译起始因子5A(Eukaryotic translation initiation factor 5A,eIF5A)的MARC-145多克隆细胞系,并验证该细胞系对PRRSV感染的影响。针对eIF5A基因构建并筛选成功获得重组慢病毒,用重组慢病毒感染MARC-145细胞,嘌呤霉素及有限稀释法进行筛选,获得敲除eIF5A的MARC-145多克隆细胞系。对构建细胞系进行活力检测,T7E1核酸内切酶、Real-time PCR以及Western blot验证eIF5A体外敲除效率,病毒增殖试验验证该细胞系对PRRSV复制的影响。结果表明：1)细胞活性检测结果显示敲除eIF5A基因对细胞活性无显著影响;2)通过T7E1核酸内切酶、Real-time PCR以及Western blot表明eIF5A表达显著降低,并将此细胞系命名为MARC-145-△eIF5A细胞系;3)使用PRRSV HN07-1感染MARC-145-△eIF5A,体外试验证明敲除eIF5A对PRRSV的增殖有抑制作用。综上,本研究成功构建eIF5A基因敲除的MARC-145多克...
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| 关 键 词： | 真核翻译起始因子5A PRRSV CRISPR/Cas9 MARC-145细胞 |
| 收稿时间： | 2022-02-22 |
Establishment of eIF5A gene knockout polyclonal MARC-145 cell line and its effect on PRRSV infection |
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| Li Huawei,Wang Xuying,Jing Huiyuan,Wan Bo,Qiao Hongxing,Guo Kewei,Hou Wenjing. Establishment of eIF5A gene knockout polyclonal MARC-145 cell line and its effect on PRRSV infection[J]. Journal of China Agricultural University, 2023, 28(7): 122-129 |
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| Authors: | Li Huawei Wang Xuying Jing Huiyuan Wan Bo Qiao Hongxing Guo Kewei Hou Wenjing |
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| Affiliation: | College of Food and Bioengineering, Henan University of Animal Husbandry and Economy, Zhengzhou 450046, China; Institute of Animal Product Quality and Safety Technology, Henan University of Animal Husbandry and Economy, Zhengzhou 450046, China;College of Veterinary Medicine, Henan University of Animal Husbandry and Economy, Zhengzhou 450046, China;College of Veterinary Medicine, Henan Agricultural University, Zhengzhou 450046, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | eIF5A PRRSV CRISPR/Cas9 MARC-145 cell |
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