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玉米隐性核不育保持系表达载体构建
引用本文:宋广树,刘文国,吕庆雪,刘宏伟,李春雷,王敏,王晶,张志军.玉米隐性核不育保持系表达载体构建[J].玉米科学,2016,24(2):35-39,46.
作者姓名:宋广树  刘文国  吕庆雪  刘宏伟  李春雷  王敏  王晶  张志军
作者单位:吉林吉农高新技术发展股份有限公司, 吉林公主岭 136100;吉林省农业科学院, 长春 130124,吉林吉农高新技术发展股份有限公司, 吉林公主岭 136100;吉林省农业科学院, 长春 130124,吉林吉农高新技术发展股份有限公司, 吉林公主岭 136100,吉林吉农高新技术发展股份有限公司, 吉林公主岭 136100;吉林省农业科学院, 长春 130124,吉林吉农高新技术发展股份有限公司, 吉林公主岭 136100,吉林吉农高新技术发展股份有限公司, 吉林公主岭 136100,吉林吉农高新技术发展股份有限公司, 吉林公主岭 136100,吉林吉农高新技术发展股份有限公司, 吉林公主岭 136100;吉林省农业科学院, 长春 130124
基金项目:吉林省科技厅产业技术创新战略联盟项目"新型雄性不育化玉米种子生产技术"(20140309005NY)、国家支撑计划项目"春玉米区商业化育种技术研究与示范项目"(204BAD01B01)
摘    要:在Genebank中搜索花粉致死基因Zm AA1、花粉育性恢复基因Ms45、粉质胚乳突变基因Mucronate及各基因特异调控因子和终止子序列,并在目的片段的上下游设计增加同尾酶Spe I(Nhe I、Xba I)和酶切后具有各种类型的DNA片段的Esp3I酶切位点,基因合成构建到克隆载体puc57上,命名为puc-Zm AA1、puc-Ms45、puc-Mc。采用传统酶切连接的方法将目的片段构建到植物表达载体p CAMBIA3300上,并用热击法将重组质粒导入农杆菌LBA4404及EHA105中,酶切、PCR检测及核苷酸序列测定证明,植物表达载体构建成功。

关 键 词:玉米  Mucronate基因  Ms45基因  ZmAA1基因  表达载体
收稿时间:2015/9/14 0:00:00

Expression Vector Construction of Recessive Genic Male Sterility Maintainer Line of Maize
SONG Guang-shu,LIU Wen-guo,L&#; Qing-xue,LIU Hong-wei,LI Chun-lei,WANG Min,WANG Jing and ZHANG Zhi-jun.Expression Vector Construction of Recessive Genic Male Sterility Maintainer Line of Maize[J].Journal of Maize Sciences,2016,24(2):35-39,46.
Authors:SONG Guang-shu  LIU Wen-guo  L&#; Qing-xue  LIU Hong-wei  LI Chun-lei  WANG Min  WANG Jing and ZHANG Zhi-jun
Institution:Jilin Agricultural Hi-tech Development Co., Ltd., Gongzhuling 136100;Jilin Academy of Agricultural Sciences, Chanchun 130124, China,Jilin Agricultural Hi-tech Development Co., Ltd., Gongzhuling 136100;Jilin Academy of Agricultural Sciences, Chanchun 130124, China,Jilin Agricultural Hi-tech Development Co., Ltd., Gongzhuling 136100,Jilin Agricultural Hi-tech Development Co., Ltd., Gongzhuling 136100;Jilin Academy of Agricultural Sciences, Chanchun 130124, China,Jilin Agricultural Hi-tech Development Co., Ltd., Gongzhuling 136100,Jilin Agricultural Hi-tech Development Co., Ltd., Gongzhuling 136100,Jilin Agricultural Hi-tech Development Co., Ltd., Gongzhuling 136100 and Jilin Agricultural Hi-tech Development Co., Ltd., Gongzhuling 136100;Jilin Academy of Agricultural Sciences, Chanchun 130124, China
Abstract:According to Genbank, ZmAA1, Ms45, Mucronate(Mc) target gene and its specific promoter and terminator sequence were found, and design to plus restriction endonuclease on the downstream of fragment of isocaudomers Spe I(Nhe I, Xba I), synthetic gene inserted into a cloning vector puc57, named puc-ZmAA1, puc-Ms45 and puc-Mc. Target gene was inserted into an expression vector pCAMBIA3300 used traditional construction methods digested connection, and induced into Agrobacterium line LBA4404 and EHA105 by freeze-thaw method. Confirm plant expression vector was constructed successfully through digestion, PCR detection and homologous analysis.
Keywords:Maize  Mucronate gene  Ms45 gene  ZmAA1 gene  Expression vector
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