猪瘟病毒E^ms基因RNase酶活性位点的定点突变对其原核表达的影响 |
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作者姓名: | 白霞 李润成 余兴龙 丁建 黎满香 |
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作者单位: | 湖南农业大学动物医学院,湖南长沙410128 |
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摘 要: | 利用重组PCR技术将猪瘟病毒兔化弱毒株(Hog cholera virus lapinized Chinese strain,HCLV)ETM编码区30位His残基密码子CAT突变为Pro残基密码子CCC,将突变后的基因克隆至原核表达载体pET-28a(+)qb,构建成重组质粒pETmE^ms,并将此重组子转入宿主菌BL21(DE3)plysS中,在IPTG的诱导下表达重组转化菌.结果:突变的mE^ms基因能在pET表达系统成功表达.用Western blotting检测表明,所表达的蛋白是猪瘟病毒特异性的,但克隆于pET-28a(+)d?未突变的E^ms基因却不能表达,说明E^ms基因的RNA酶活性是影响该基因在Escherichia coli中表达的因素之一.
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关 键 词: | 猪瘟病毒 E^ms基因 定点突变 RNase酶活性 原核表达 |
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