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农杆菌介导创伤胚转化的应用
引用本文:张丽君,刘龙龙,张建珍,孙毅,康国帅,周建平,崔林. 农杆菌介导创伤胚转化的应用[J]. 安徽农业科学, 2015, 0(3): 25-28. DOI: 10.3969/j.issn.0517-6611.2015.03.009
作者姓名:张丽君  刘龙龙  张建珍  孙毅  康国帅  周建平  崔林
作者单位:山西省农业科学院农作物品种资源研究所,农业部黄土高原作物基因资源与种质创制重点实验室,山西太原030031;山西大学应用生物学研究所,山西太原,030031;山西省农业科学院生物技术研究中心,山西太原,030031
基金项目:国家燕麦荞麦产业技术体系(CARS-08-A-1);山西省农科院博士基金项目(YBSJJ209)
摘    要:[目的]优化农杆菌介导创伤胚转化的方法,提高转化率,培育具有特定功能的转基因品种,改善作物的生存能力和生态环境适应力。[方法]参照农杆菌划胚介导植物萌发种子基因转化方法,以燕麦、玉米和高粱的萌发种子为试验材料,农杆菌菌株LBA4404(含质粒P3301ubi Ac)侵染转化燕麦、玉米和高粱的萌发种子,优化转化条件,探索燕麦、玉米和高粱遗传转化体系,探讨菌液浓度、种子萌发时间、超声波功率、乙酰丁香酮和草丁膦浓度对3种作物的影响并进行比较分析。[结果]农杆菌菌液浓度为0.6OD600≥0.4时转化效果最佳;第1次超声波功率为900 W,处理时间为10 min;第2次超声波功率为200 W,处理时间为4 min效果最佳。转化效率最高;添加乙酰丁香酮对燕麦、高粱和玉米的发芽有明显促进作用,但转化效果有明显区别;燕麦、玉米和高粱的转化植株对草丁膦的耐受性差异不大,与非转化植株相比,0.8 mg/L除草剂胁迫下燕麦、玉米和高粱种子萌发受到一定程度的抑制。用1 mg/L除草剂溶液对T0和T1代转化植株幼苗进行筛选,转化植株的存活率高于对照。[结论]经除草剂筛选和PCR对T0和T1代幼苗检测,初步证明获得了转化植株。

关 键 词:植物转化  燕麦  玉米  高粱

Trauma Embryo of Genetic Transformation System with Agrobacterium Mediated Method
ZHANG Li-jun;LIU Long-long;ZHANG Jian-zhen;CUI Lin. Trauma Embryo of Genetic Transformation System with Agrobacterium Mediated Method[J]. Journal of Anhui Agricultural Sciences, 2015, 0(3): 25-28. DOI: 10.3969/j.issn.0517-6611.2015.03.009
Authors:ZHANG Li-jun  LIU Long-long  ZHANG Jian-zhen  CUI Lin
Affiliation:ZHANG Li-jun;LIU Long-long;ZHANG Jian-zhen;CUI Lin;Crop germplasm resources research institute,Shanxi Academy of Agricultural Sciences;Key Laboratory of Crop Gene Resources and Germplasm Enhancement on Loess Plateau,Ministry of Agriculture,P. R. China;Research Institute of Applied Biology,Shanxi University;
Abstract:
Keywords:Plant transformation  Oat  Maize  Sorghum
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