柑桔溃疡病菌的PCR检测方法研究 |
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作者姓名: | 董欢 邓欣 粟玉刚 程天印 |
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作者单位: | 1. 湖南农业大学生物安全与技术学院,长沙,410128 2. 湖南农业大学动物医学院 |
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摘 要: | 通过优化PCR反应条件,拟建立快速、特异、准确的检测柑桔溃疡病的方法。试验结果表明,25μL优化反应体系:10×PCR缓冲液2.5μL,10 mM/L dNTPs 0.5μL(终浓度为0.2 mM/L),2 U/μLTaq DNA聚合酶0.5μL(终浓度为0.04 U/μL),5 mM/L引物各0.5μL(终浓度为0.1 mM/L),DNA模板1μL(终浓度为6.0×10~6cfu/mL/mL),灭菌ddH_20 19.5μL;PCR扩增退火温度为59℃;柑桔溃疡病菌病茵浓度检测下限为6.0×10~3cfu/mL,可以获得柑桔溃疡病菌的特异性片段,能够满足生产中对柑桔溃疡病检测的要求。
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关 键 词: | 柑桔溃疡病 PCR 特异性引物 检测方法 |
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