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柔嫩艾美耳球虫各阶段虫体纯化方法的改进
作者姓名:蒋建林 蒋金书
作者单位:1.,武汉,430070
基金项目:国家攀登计划B类项目!85-44-01
摘    要:本文报道了改进的柔嫩艾美耳球虫各阶段虫体纯化方法。用胃蛋白酶消化盲肠道组织,铜筛过滤除去大颗粒杂质后,以1.1mol·mL-1蔗糖离心漂浮卵囊,然后用小于0.5mol·mL-1蔗糖溶液反复漂洗,最后以5%次氯酸钠消毒处理,获得了大量纯化柔嫩艾美耳球虫卵囊。孢子化卵囊经研磨,消化,游离出子孢子后,过DEAE-纤维素52层析柱,以0.05mol·mL-1,Tris-HCl,(pH=80,0.15mol·mL1-NaCl)洗脱,层析往高5cm,洗脱液水柱高3cm,流速为2mL·min-1,纯化出了子孢子。取人工感染球虫鸡的120h后的盲肠,游离出第二代裂殖子,铜筛过滤后,过柱方法同前,纯化出了第二代裂殖子。结果证明本法分离的子孢子和第二代裂殖子活性好,回收率达87%。

关 键 词:柔嫩艾美耳球虫 卵囊 子孢子 第二代裂殖子
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